纳米型NMDA对肥育猪生长和胴体组成的影响及NMDA调控生长机理研究

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本课题以N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)为试验材料,以“杜洛克×长白×大白”肥育猪为试验对象,研究普通型、吸附型(纳米硅酸盐为载体)和钠米型(纳米级)NMDA对猪生长性能、胴体组成和内分泌水平的影响,探讨了NMDA对猪生长激素和生长抑素动态分泌模式、腺垂体生长激素(GH)mRNA丰度和下丘脑生长激素释放激素(GHRH)mRNA丰度的影响,并通过体外细胞培养试验,研究NMDA对腺垂体生长激素和下丘脑细胞信使物质分泌的影响。饲养试验中每种形式NMDA均以50,100,150mg/kg剂量添加于基础日粮。选择300头体重接近的肥育猪,随机分为10组,每组3个重复,每个重复10头,公母各半。其中一组设为对照,其余分别饲喂上述相应试验日粮,饲养试验为期6周。饲养试验结束前,从对照组及生长最佳组分别选取试验猪6头,喂食相应试验日粮,1h后,分别耳静脉采血,试验于13∶00至16∶00,15min间隔采样一次,并分别制备血清进行生长激素及生长抑素动态分泌模式研究;饲养试验结束后,分别从对照及不同形式NMDA处理生长最佳组中各选取体重接近的肥育猪(公母各半)12头,共48头,屠宰,进行胴体分割,并取血清及组织样品进行内分泌、腺垂体GH mRNA、下丘脑GHRH mRNA丰度及相关代谢指标分析。体外腺垂体和下丘脑细胞培养中NMDA设置10-8,10-6,10-4mol/L 3个浓度梯度,每个浓度设6个重复,并设一个空白浓度,分别测定生长激素及细胞信使物质水平。试验获得以下主要结果: 1、饲养试验表明,各形式NMDA均不同程度改善了肥育猪日增重,并且在不同形式NMDA的三个剂量设置中,均呈现100mg/kg剂量效果优于同形式其他剂量组,但仅100mg/kg纳米型NMDA促生长达到显著水平,较对照组比较提高了9.15%(P<0.05)。料重比的变化呈现与日增重变化相一致的趋势,100和150mg/kgNMDA均显著改善了料重比,分别较对照组降低了2.45%(P<0.05)和2.75%(P<0.01)。NMDA处理对猪采食量未产生显著影响。从试验可以看出,各剂量纳米NMDA的促生长效果优于普通型和吸附型NMDA。 2、屠宰试验显示,各形式NMDA改善了肥育猪胴体组成,并均以纳米型效果最为明显。与对照组比较,100mg/kg纳米NMDA处理组胴体瘦肉率提高了5.81%(P<0.05),脂肪率降低了18.93%(P<0.05),眼肌面积增加了8.78%(P<0.05)。此外,100mg/kg吸附型NMDA亦显著提高了猪只胴体瘦肉率,较对照提高了浙江大学博士学位论文:纳米型NMDA对肥育猪生长和胭体组成的影响及NMDA调控生长机理研究4.81%(P<0 .05)。从背部不同位点背膘厚度可以看出,普通型和纳米型NMDA显著降低了髻甲部背膘厚,较对照组分别下降了13.97%(尸<0 .05)和12.70%(尸<0 .05);吸附型和纳米型NMDA显著降低了最后肋骨处背膘厚,分别较对照组降低了26.20%(尸<0.05)和21.39%(尸<0.05);骨骼肌组成分析表明,在背最长肌和股二头肌增重效果上,以100m妙g纳米型NMDA为最佳,分别较对照组提高了8.33%(P<0.05)和10.53%(尸<0.05);而半健肌增重以100m留kg吸附型NMDA效果最好,较对照组增加了17.50%(P<0.05),纳米型组增加了12.50%(P>0.OS)。 3、生长激素和生长抑素动态分泌模式分析表明,NMDA处理显著提高了试验猪只生长激素分泌的总体水平、基线水平和峰强度,分别较对照猪只提高了41.01% (P<0.05),44.70%(P<0.05)和29.44%(P< 0.05),而NMDA对猪只生长激素分泌频率和峰持续时间未产生显著影响。从性别角度而言,阉公猪生长激素分泌总体水平增加36.91%(P<0.05),基线水平提高了55.69%(尸<0.05),而峰频率、峰持续时间和峰强度无显著变化,母猪生长激素分泌总体水平提高了45.95%(尸<0.05),基线水平提高了50.10%(尸<0.05),与阉公猪一致,峰频率、峰持续时间和峰强度无显著变化。NMDA虽提高了阉公猪与母猪生长抑素的分泌水平,但差异不显著 (尸)0 .05)。 4、血清激素指标分析显示,各形式NMDA处理后,试验猪只血清胰岛素样生长因子一I水平均较对照组有一定的提高,以100mg/k纳米型NMDA效果最为显著,提高了21.91%(尸<0.05)。吸附型和纳米型NMDA均显著提高血清三碘甲腺原氨酸(T3)和四碘甲腺原氨酸水平(T4),其中T3较对照组分别提高了51.79% (P<0.05)和60.71%(P<0.05),T4分别提高了200.75%(P<0.05)和236.48% (尸<0.05)。胰岛素略有增加,但差异不显著。 5、研究表明,吸附型和纳米型NMDA均显著降低了试验猪下丘脑cAMP水平,分别较对照降低了10.12%(尸<0.01)和12‘73%(P<0.01),而cGMP呈现增加趋势。纳米型NMDA还显著提高了下丘脑一氧化氮合酶的活性。吸附型和纳米型NMDA亦显著增加了腺垂体cAMP浓度,分别较对照组提高了23 .56%(P<0.05)和52.67%(尸<0.05)。此外,纳米NMDA显著提高了肝脏cAMP水平,较对照组增加了7.75%(p<0.05)。各试验组下丘脑天冬氨酸(ASP)含量较对照组均有提高,但仅IOOm留kg纳米型NMDA组达显著水平,较对照组提高了14.56%(尸<0 .05),浙江大学博士学位论文:纳米型NMDA对肥育猪生长和胭体组成的影响及NMDA调控生长机理研究腺垂体中ASP含量无显著差异。 6、血清相关代谢指标分析显示,不同形式NMDA对肥育猪血清
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