血栓闭塞性脉管炎(Thromboangiitis Obliterans,TAO)是常见的周围动脉慢性闭塞性疾病之一,也是导致青壮年人截肢的最常见血管疾病。 TAO是一种非动脉硬化性、炎症性、四肢中小动脉及静脉闭塞性疾病,病变主要累及四肢远端的中、小动脉及伴行静脉,远端的动脉闭塞有时可伴有血栓性静脉炎。早在1908年,Leo Buerger就认识到这个特别好发于年轻人的血管炎症性疾病—血栓闭塞性脉管炎,但是一个世纪后,对TAO的发病机制和病因仍然所知甚少。 TAO病因不明,病情复杂,在治疗上非常困难,外科治疗虽然可以缓解缺血的症状,但是常常由于缺少合适的流出道而失败。 目前,已有文献报道应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)治疗慢性下肢动脉缺血的实验研究和临床研究,但是关于内源性VEGF蛋白表达的文献报道很少。本课题的目的就是通过建立TAO大鼠模型,观察大鼠模型缺血后肢内源性VEGF蛋白表达与后肢侧支血管形成的关系,为外源性基因治疗提供试验、理论依据。 首先应用月桂酸钠成功的建立TAO大鼠模型。购买雄性Wistar大白鼠50只,随机分为对照组5只和模型组45只。模型组根据观察期限,又分为12小时、1天、2天、3天、1周、2周、3周、4周、5周九个组别,模型组各组别均设5只实验大鼠(n=5只)。在显微镜下完成手术,向股动脉远心端注入月桂酸钠溶液。 分别于12小时、1天、2天、3天、1周、2周、3周、4周、5周处死动物,留取标本。通过免疫组化和RT-PCR的方法来观察VEGF的表达情况,通过Ⅷ因