新加良附方抑制人胃癌细胞增殖的分子机制研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lipengzhangchinese
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胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,是全球共同关注的世界性卫生问题。我国是胃癌大国,在我国,多数患者就诊时已属中晚期,丧失手术根治可能。化疗是中晚期胃癌主要的治疗措施,但疗效不容乐观,且伴有显著的治疗相关毒性。中医药在胃癌治疗中扮演着重要角色。既往研究证实新加良附方可通过诱导胃癌细胞凋亡、调控肿瘤新生血管生成、抑制癌基因的表达等抑制胃癌生长。本研究以细胞凋亡为切入点,从caspase-3、p53及miR-34a相关的通路角度进一步明确新加良附方及其主要成分薯蓣皂苷抗胃癌效应机制,为临床治疗胃癌提供依据。目的1.观察新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清对人胃癌细胞BGC-823的增殖抑制作用。2.从caspase-3、p53及miR-34a表达水平方面探讨新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清可能的作用机制。方法1.制备新加良附方及薯蓣皂苷药物血清,并作用于胃癌细胞株BGC-823,使用MTS方法检测细胞增殖抑制率。2.采取real-time PCR方法观察新加良附方及薯蓣皂苷药物血清对人胃癌细胞BGC-823中caspase-3及p53表达的影响。3.采取real-time PCR方法检测胃癌细胞中miR-34a表达水平。结果1.新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清对胃癌细胞BGC-823有明显的增殖抑制作用,并且其作用与时间呈正相关。新加良附方药物血清对胃癌细胞BGC-823的增殖抑制作用在48h、72h高于其主要成分薯蓣皂苷药物血清。2.人胃癌细胞BGC-823中caspase-3的表达明显低于其在正常胃黏膜上皮细胞GES-1中的水平,p53基因表达水平高于正常GES-1细胞中的p53表达水平。新加良附方药物血清及薯蓣皂苷药物血清作用于BGC-823细胞后其caspase-3表达水平均明显上升,且随着时间增加其表达量升高;二者作用于BGC-823细胞后p53基因表达水平下降,并且与时间呈负相关。新加良附方与其主要成分薯蓣皂苷相比较,二者对caspase-3、p53的调控作用无明显差异,但是新加良附方显示出优于薯蓣皂苷的优势。3.胃癌细胞中miR-34a表达水平高于正常胃黏膜上皮细胞GES-1。结论新加良附方及其主要成分薯蓣皂苷可以显著抑制胃癌BGC-823细胞的生长,新加良附方对胃癌细胞的抑制作用高于其主要成分薯蓣皂苷。新加良附方及薯蓣皂苷抑制胃癌细胞增殖作用可能与增加凋亡相关蛋白caspase-3表达,抑制突变型p53表达相关。miR-34a可能发挥癌基因的作用,应明确其作用并进行下一步研究。
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