谷胱甘肽对黄颡鱼生长性能和抗氧化功能的影响

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ytlytl1009
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本论文研究了饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)幼鱼生长性能、体成分、血清生化指标、免疫抗氧化性能、血细胞凋亡、抗氨氮应激能力及生长抗氧化凋亡相关基因表达的影响。本论文主要包括以下五个方面的内容:  1.饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼幼鱼生长性能、体成分、血清生化指标的影响  选用初始体重为(1.32±0.01)g的黄颡鱼800尾,随机分为5组,每组4个重复,每个重复40尾鱼,分别投喂基础饲料和添加100、300、500、700mg/kg还原型谷胱甘肽的试验饲料,饲养56d后,采样分析。结果显示,随着饲料中谷胱甘肽添加量的增加,黄颡鱼的增重、特定生长率和蛋白质效率呈现先升高后下降的趋势,均在添加量为300mg/kg时达到最大值,且100~500mg/kg组均显著高于对照组(P<0.05);各组之间的饲料系数、肥满度和肝体比差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,300~700mg/kg组全鱼粗蛋白质和100~700mg/kg全鱼粗脂肪含量显著升高(P<0.05)。饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼血清总蛋白、胆固醇、甘油三酯、葡萄糖、尿素氮水平和谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性均无显著影响(P>0.05)。综上所述,饲料中添加谷胱甘肽可以提高黄颡鱼幼鱼的生长性能、全鱼粗蛋白质和粗脂肪含量。利用二次回归方程拟合特定生长率和谷胱甘肽添加水平,得出谷胱甘肽在黄颡鱼幼鱼饲料中的适宜添加量为357.69mg/kg。  2.饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼幼鱼免疫、抗氧化性能的影响  上述饲养试验结束后,采集肝脏和血清检测免疫、抗氧化相关指标及谷胱甘肽含量。结果显示,除100mg/kg组外,饲料中添加GSH显著提高黄颡鱼肝脏、血清GSH含量(P<0.05),当GSH添加量≥300mg/kg时,肝脏和血清GSH含量均呈现稳定状态。随着饲料中谷胱甘肽水平的增加,血清免疫和肝脏抗氧化指标均呈现先升高后降低的趋势,其中300mg/kg和500mg/kg组溶菌酶与碱性磷酸酶活性、300mg/kg组免疫球蛋白M与补体4含量、500mg/kg组酸性磷酸酶活性与对照组相比显著升高(P<0.05)。与对照组和700mg/kg组相比,300mg/kg组肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶活性和总抗氧化能力与血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性均显著高升高(P<0.05)。由此可见,饲料中添加谷胱甘肽能提高黄颡鱼幼鱼免疫及抗氧化性能,其中以300-500mg/kg为宜。  3.饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼幼鱼血细胞凋亡的影响  上述饲养试验结束后,采集黄颡鱼血细胞进行凋亡相关指标的检测。结果显示,随着饲料中谷胱甘肽添加水平的增加,黄颡鱼血细胞活性氧浓度和凋亡率呈先降低后升高的趋势,其中100~500mg/kg组活性氧浓度和凋亡率均显著低于对照组和700mg/kg组(P<0.05),且均在300mg/kg组最低。100mg/kg和300mg/kg组血细胞钙离子浓度呈现稳定状态,但从500mg/kg组开始升高,且500mg/kg和700mg/kg组均显著高于100~300mg/kg组(P<0.05)。结果表明,饲料中添加适量的谷胱甘肽可以降低黄颡鱼幼鱼血细胞活性氧浓度,并能使血细胞内的钙离子浓度维持在一定的水平,能抑制血细胞的凋亡,但高剂量的谷胱甘肽会使胞浆内的钙离子浓度显著升高,引发细胞程序性凋亡。  4.饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼幼鱼抗氨氮应激能力的影响  上述饲养试验结束后,每个重复随机选取20尾鱼,用氯化铵作为应激源进行应激试验。分别在应激72h和96h统计累计死亡率,并在96h时采集血清和肝脏,检测相关应激和抗氧化指标。结果显示,应激72h和96h时,各添加组的累积死亡率均低于对照组,且随着添加量的增加累积死亡率呈现先降低后升高的趋势,并均在300mg/kg组达到最低,其中96h时,100mg/kg和300mg/kg组均分别显著低于对照组(P<0.05)。添加组黄颡鱼死亡时间较对照组延迟,96h时,各添加组黄颡鱼累积死亡率均低于对照组,其中100mg/kg和300mg/kg组显著降低(P<0.05)。应激96h时,血清皮质醇、尿素氮和血氨随谷胱甘肽剂量的增加呈先降低后升高的趋势,且各试验组的血清皮质醇浓度均低于对照组,其中100mg/kg组和300mg/kg组达到显著水平(P<0.05)。300mg/kg组血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。氨氮应激96h时,与对照组相比,300mg/kg组肝脏和血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶活性均显著升高(P<0.05),且300mg/kg组血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。综上所述,饲料中添加适量的谷胱甘肽能降低黄颡鱼幼鱼氨氮应激累计死亡率,降低皮质醇浓度,提高抗氧化酶活性。  5.饲料中添加谷胱甘肽对黄颡鱼幼鱼生长、抗氧化及凋亡相关基因mRNA表达量的影响  上述饲养试验结束后,采集肝脏进行荧光定量分析。结果显示,随着谷胱甘肽量的增加,黄颡鱼肝脏类胰岛激素生长因子1、B淋巴细胞瘤2基因、热休克蛋白70、雷帕霉素靶蛋白mRNA的表达量呈先升高后降低的趋势,谷胱甘肽硫转移酶和B淋巴细胞瘤x相关基因mRNA的表达变化规律刚好相反;其中,与对照组相比,300mg/kg组和500mg/kg组类胰岛激素生长因子1、100~500mg/kg组B淋巴细胞瘤2基因、各添加组热休克蛋白70mRNA表达量显著升高(P<0.05),300mg/kg组B淋巴细胞瘤x相关基因mRNA表达量显著降低(P<0.05);各组间谷胱甘肽硫转移酶和雷帕霉素靶蛋白mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。由此可见,饲料中添加适量谷胱甘肽能上调黄颡鱼幼鱼肝脏类胰岛激素生长因子1、B淋巴细胞瘤2基因、热休克蛋白70、雷帕霉素靶蛋白mRNA的表达,并下调谷胱甘肽硫转移酶和B淋巴细胞瘤x相关基因mRNA的表达。
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