复脉汤对缺血性心律失常心肌酶及Cx43 Ser262磷酸化信号通路影响的实验研究

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目的研究复脉汤对缺血性心律失常大鼠血清心肌酶谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ),心律失常出现时间、持续时间及发生次数,及细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)介导Cx43 ser262磷酸化信号通路的影响,并探讨其抗缺血性心律失常作用及机理。方法清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、酒石酸美托洛尔组、炙甘草汤组及复脉汤高、中、低剂量组。连续灌胃14天,结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法制备急性心肌缺血心律失常模型(除假手术组外)。(1)检测血清心肌酶ASL、CK-MB、cTnⅠ的含量(2)透射电子显微镜下观察心肌组织超微结构的变化(3)记录缺血性心律失常出现时间和持续时间及室性心律失常的发生次数(4)采用蛋白质印迹试验(Western blot)检测心室肌细胞ERK及Cx43 Ser262磷酸化水平。结果1.对心肌酶AST、CK-MB、cTn Ⅰ含量的影响:复脉汤高、中、低剂量组及美托洛尔组能明显降低血清AST、CK-MB、cTnⅠ含量,与模型组比较有显著差异(P<0.01)。复脉汤高剂量组及美托洛尔组血清AST、CK-MB、cTnⅠ含量显著低于炙甘草汤组(P<0.01)。复脉汤中、低剂量组与炙甘草汤组比较,能降低AST、CK-MB含量(P<0.05),复脉汤中剂量组降低cTnⅠ含量,与炙甘草汤组比较有差异(P<0.05)。2.心肌细胞电镜观察:复脉汤能明显减轻大鼠心肌缺血损伤程度,可以改善心肌细胞超微结构:模型组心肌细胞肌原纤维断裂、扭曲、缩短,线粒体排列紊乱,结构破坏。假手术组心肌细胞Z线规则,肌小节清晰,线粒体排列整齐。炙甘草汤组心肌纤维排列欠规则,部分肌小节断裂,出现收缩带,线粒体排列不规则,结构破坏。复脉汤高、中、低剂量组及美托洛尔组肌原纤维排列基本规则,线粒体结构较完整。3.对缺血性心律失常影响:复脉汤高、中、低剂量组及美托洛尔组与模型组比较,能显著延迟心律失常出现时间,缩短持续时间,减少室性心律失常发生次数(P<0.01),复脉汤高剂量组及美托洛尔组与炙甘草汤组比较(P<0.01);复脉汤中剂量组与炙甘草汤组比较,能延迟心律失常出现时间,缩短持续时间(P<0.05)。复脉汤中、低剂量组与炙甘草汤组比较,能减少室性心律失常发生次数(P<0.05)。4.抑制ERK介导Cx43 Ser262磷酸化水平:复脉汤高、中、低剂量组,美托洛尔组能明显降低ERK/GAPDH和Cx43 pser262/GAPDH,与模型组比较(P<0.01)。复脉汤高剂量组、美托洛尔组ERK/GAPDH和Cx43 pser262/GAPDH显著低于炙甘草汤组(P<0.01),复脉汤中剂量组与炙甘草汤组比较,能降低ERK/GAPDH和Cx43 pser262/GAPDH(P<0.05)。结论1.复脉汤能降低急性心肌缺血血清心肌酶AST、CK-MB、cTn Ⅰ的含量,减轻心肌细胞超微结构的损伤,对心肌缺血有保护作用。2.复脉汤能推迟缺血性心律失常出现时间,缩短持续时间,减少缺血性室性心律失常的发生。3.复脉汤对缺血性心律失常的保护作用,可能与其调控ERK介导心肌细胞Cx43Ser262磷酸化信号通路,调控缺血引发的心肌细胞通讯功能的降低有关。4.复脉汤对缺血性心律失常的保护作用可能与其减轻心肌组织缺血性损伤,保障心肌细胞膜完整性,减少了 AST、CK-MB、cTn Ⅰ外漏,保证了心肌细胞肌原纤维及线粒体的完整性,抑制ERK介导Cx43 Ser262磷酸化等有关。
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