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本文成功克隆了河豚IL-4 cDNA全序列,并在毕赤酵母系统中诱导表达了重组IL-4。河豚IL-4 cDNA:全长834bp,包括39bp的5非编码区(5UTR),375bp的3非编码区(3UTR)和420bp的开放阅读框架(ORF),其翻译得到的多肽含139个氨基酸,预测分子量约16.131kDa。河豚IL-4基因与已知的哺乳动物和鸟类有相同的结构,即由四个外显子和三个内含子组成。它的编码蛋白与其他同源体有11%-16%的同源相似性。用优化条件的RT-PCR半定量估测IL4在河豚各个组织中的表达水平,结果显示,IL-4在所选组织中均为组成性表达,包括头肾、脾脏、肝脏、大脑、鳃、肌肉和心脏,其中头肾、脾脏和肝脏的表达量较低。IL-4的组成性表达与它对免疫细胞因子调节的潜在作用是相一致的。用2 μ g ConA、2 μ g PHA和2μg PMA的混合诱导剂刺激河豚,可以发现IL-4在以上所检测组织中的表达量显著上升,这一结果也预示了有丝分裂原激活IL-4的炎症免疫应答。此外,成功构建了重组表达质粒pPIC9k-IL4,并将其重组整合入GS115毕赤酵母基因组,通过组氨酸缺陷型培养基MD和G418筛选获得含有多个拷贝的毕赤酵母转化子,经甲醇诱导,在毕赤酵母表达系统中检测到约16kDa的条带,与预期的重组蛋白大小相一致。这是关于鱼类IL-4的克隆、鉴定和表达的首例报道。