葛根总黄酮对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:neocage
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目的:研究葛根总黄酮对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激损伤的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:以HUVECs为研究对象,实验分为空白组、模型组、阳性药组(10μmol·L-1依达拉奉)和葛根总黄酮10,20,40,80,160 mg·L-1组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测葛根总黄酮对HUVECs的保护作用,采用分光光度法测定细胞培养上清液中细胞内超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)及NO含量;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液中内皮素1(ET-1)含量;采用二氯荧光乙酰乙酸盐(DCFH-DA)法检测活性氧(ROS)水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测内皮型一氧化氮合酶(e NOS)和血管细胞黏附分子(VCAM-1)的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞存活率显著降低(P<0.01),SOD活性,NO水平和e NOS蛋白表达显著降低(P<0.01),MDA,ET-1水平,细胞ROS水平和VCAM-1蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,葛根总黄酮(40,80,160 mg·L-1)可以显著提高氧化应激损伤的HUVECs的存活率(P<0.05,P<0.01),葛根总黄酮(20,40,80 mg·L-1)可显著增加SOD活性,升高NO水平,显著降低MDA,ET-1水平,显著降低细胞ROS水平,显著升高eNOS,降低VCAM-1的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:葛根总黄酮对H2O2诱导HUVECs氧化应激损伤有保护作用,其作用机制可能与调节SOD,MDA,ET-1,NO氧化应激相关因子,调控内皮细胞功能相关蛋白eNOS,VCAM-1的表达有关。
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