精准医疗是以个体化医疗为基础、随着基因组测序技术快速进步以及生物信息与大数据科学的交叉应用而发展起来的新型医学概念和医疗模式。精准医疗在遗传病的治疗中尤为重要,目前应用于基因治疗中的载体有腺病毒载体、慢病毒载体以及非病毒载体等,其中,慢病毒的应用最为广泛。并且,慢病毒载体在全球约89例获得批准的临床基因治疗方案中得到应用。目前最常用的是第三代自灭活慢病毒载体。慢病毒载体最初是在HIV-1病毒基因组骨架的基础上改造而来的。它能在感染非分裂细胞,还能均匀地在染色体转录活性区的各个位置进行插入整合感染,整合位点不具有选择性。但是其通读率较高,会激活下游基因的表达,造成不良影响,甚至是癌变。我们实验室一直致力于降低慢病毒载体通读率方面的研究。实验组6成员已经筛选出了能够有效降低慢病毒转录通读的元件:C-U+、2.4C-等,我在他们实验成果的基础上继续探索,试图从设计的优化原件HR、C-U+-FHLTR、FF50中选择效果较好的元件,标准有:1降低转录通读的效果较好;2对含有对应原件的慢病毒的病毒滴度、整合率等相应性质影响较小。通过实验我们选择了元件FF50,不仅在分子水平上证明了其降低慢病毒的效果较好且对含有对应原件的慢病毒的病毒滴度、整合率等相应性质影响较小,还通过构建Olacz等质粒利用原位染色和FACS等方法在蛋白水平上证明其降低通读率的效果,从而为慢病毒在临床上的应用提供了新的方案和数据基础。