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Nodal和Activin均是TGF-超家族的重要成员,在脊椎动物胚胎发育、肝脏增殖、骨髓形成、生殖、内分泌和免疫系统中发挥重要作用。Nodal主要发现在脊椎动物(包括硬骨鱼)的胚胎发育中发挥作用,而在鱼类非胚胎细胞中的功能尚不清楚。在硬骨鱼中,已知有三个Nodal相关基因(nodalrelated gene, ndr):squint (ndr1)、cyclops (ndr2)和southpaw (ndr3)。本课题获悉了草鱼squint的全长cDNA序列,组织分布研究显示它在所有检测的组织(包括垂体、脑、心脏、头肾、肾、脾和性腺)中均有表达。进一步地,我们使用原核表达系统,获得了草鱼squint的二聚化活性蛋白rgcmSQT。以静态培养的草鱼垂体细胞为模型,进一步发现rgcmSQT能以时间和剂量依赖方式显著上调activin A, B以及相应I型和II型受体(ActR IB和IIB)的mRNA表达。本研究不仅首次在硬骨鱼中发现nodal介导胚胎发育以外的功能,并且提示nodal可能调节了activin信号通路。激活素activin因其垂体功能而著名,但最近有报道称其参与了炎症过程。在硬骨鱼中,还没有activin介导免疫反应的报道。和哺乳动物一样,鱼activinA和B分别是A和B亚基的同源二聚体。在嗜水气单胞菌注射的草鱼和LPS处理的PBLs中, A亚基均有上调反应。为了解释这种炎症条件下activin的产生,我们重组表达草鱼activin A和B(rgcACVA/B),用于后续研究。虽然本实验中获得的rgcACVA/B可引起草鱼HKLs中SMAD2的磷酸化,但作用效果不及商品化的重组人激活素rhActivinA/B。随后,本实验尝试在巴斯得毕赤酵母中表达草鱼激活素A,未能获得目的蛋白。因此本课题采用rgcACVA,处理草鱼HKLs6小时,发现activin A可下调inos和il1的基因表达但不影响il6的mRNA水平,同时也可减弱LPS对这三个基因的刺激作用。在PBLs中,activin A能够下调LPS对inos和il1的上调作用。这些结果提示:在炎症条件下产生的activin,可能通过调节免疫相关基因的表达参与草鱼的炎症反应。