苹果汁中嗜酸耐热菌菌学特性及控制方法研究

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酸土脂环酸芽孢杆菌,俗称嗜酸耐热菌,是引起苹果汁风味品质变劣的主要污染菌,严重影响了苹果汁的品质和国际贸易市场竞争力,同时缺乏实用的控制技术,研究苹果汁中嗜酸耐热菌及生长规律可为提高苹果汁品质安全性提供基础理论和技术方法。本文以金帅的腐败果为原料,对分离出嗜酸耐热菌进行形态学、生理生化及16S rDNA区鉴定;研究了嗜酸耐热菌的生长特性,pH值及培养温度对嗜酸耐热菌的生长规律的影响及化学及生物方法对菌株生长的抑制作用。主要结果和结论如下:1金帅腐败果嗜酸耐热菌的分离及鉴定:经形态学特征、生理生化特性验证得到了2株与标准菌Aliyclobacillus acidoterrestris CICC 10374具有明显相似性的嗜酸耐热菌A-1与A-2,经16S rDNA序列比对并构建系统发育树,分离菌A-1、A-2与Alicyclobacillus acidoterrestris同源性≥99%,鉴定为酸土脂环酸芽孢杆菌。2嗜酸耐热菌菌学特性:从腐烂的金帅苹果中分离到的酸土脂环酸芽孢杆菌A-1与标准菌的生长趋势大致相同,均在4h时由延迟期进入对数生长期,8h时进入稳定生长期;当生长到16h之后菌体浊度缓慢降低。而A-2生长速度较快,培养14h之后营养物质消耗殆尽,菌体浊度缓慢降低。A-1、A-2均可在一个相对广泛的温度范围内生长,最适生长温度均为45℃(pH值为4.0);其生长pH范围为2.5~6.5,最适生长pH值分别为4.0、3.5。3嗜酸耐热菌耐热特性:菌株A-1芽孢在温度90℃, pH3.5, SS5°Brix条件下D值最小为10.31min;菌株A-2芽孢在温度95℃, pH3.5, SS12.5°Brix条件下D值最小为14.39min。4菌株A-2生长的控制:防腐剂1及防腐剂4对菌株生长的抑制作用明显。从抑菌效果来看,3mg/kg防腐剂1处理不同时间,抑菌效果均呈现出显著性差异,4mg/kg处理120h可达到国际贸易中对浓缩苹果汁中脂环酸芽孢杆菌限量要求。200mg/kg防腐剂4处理不同时间条件下,抑菌效果呈现出显著性差异,2OOmg/kg处理120h可达到国际贸易中对浓缩苹果汁中脂环酸芽孢杆菌限量要求。
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