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目的:探讨Survivn、Caspase-3和Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义,分析三者表达的相关性,进而研究各组子宫平滑肌肿瘤中增殖与凋亡平衡的变化,为子宫平滑肌肿瘤之间的鉴别诊断及基因靶向治疗提供理论依据;比较免疫组化法与免疫荧光双标记法所得实验结果,探讨免疫荧光双标记法联合激光共聚焦显微镜在医学研究中的意义。方法:运用免疫组织化学二步法检测30例子宫富于细胞型平滑肌瘤(CUL)、15例子宫平滑肌肉瘤(LMS)、10例普通型子宫平滑肌瘤(OUL)、10例正常子宫平滑肌组织(NUSM)及10例正常子宫内膜组织中Survivin、caspase-3、Ki-67的表达情况。采用免疫荧光双标记法检测其中50例(每组10例)标本中Ki-67和Survivin的共表达情况,运用激光扫描共聚焦显微镜观察并采集荧光图片。对免疫组织化学和免疫荧光双标记法两种方法所得结果进行比较。运用SPSS13.0软件包对实验结果进行统计学分析。结果:(1).Survivin在正常子宫内膜组织中阳性表达,而在正常子宫肌层组织中没有检测到表达。Survivin在普通型组、富于细胞型组、肉瘤组中表达的阳性率分别为60.00%(6/10)83.33%(25/30)、100.00%(15/15),呈明显上升趋势,且普通型组与肉瘤组之间有显著性差别(χ2=6.576,P<0.05)。(2).Caspase-3在正常子宫内膜中有阳性表达,在正常平滑肌组、普通型组、富于细胞型组、肉瘤组表达的阳性率分别为90.00%(9/10)、60.00%(6/10)、46.67%(14/30)、20.00%(3/15),呈明显下降趋势,且正常平滑肌组与富于细胞型组(χ2=8.855,P<0.05)、正常平滑肌组与肉瘤组之间(χ2=14.565,P<0.05)有显著性差别。(3).Ki-67在正常子宫内膜组织中有阳性表达,而在正常平滑肌组织中阴性表达。.Ki-67在普通型组、富于细胞型组、肉瘤组中的表达的阳性率分别为30.00%(3/10)、76.67%(23/30)、100.00%(15/15),呈明显上升趋势,且普通型组与肉瘤组(χ2=18.638,P<0.05)、富于细胞型组与肉瘤组之间(χ2=8.305,P<0.05)有显著性差别。(4).在富于细胞型组和肉瘤组中Survivin与Caspase-3的表达均呈呈显著负相关(rs=-0.647,p<0.01;rs=-0.556,p<0.05),Survivin与Ki-67的表达均呈显著正相关(rs=0.745,p<0.01;rs=0.670,p<0.01),Ki-67与Caspase-3的表达均呈显著负相关(rs=-0.394,p<0.05;rs=-0.642,p<0.01)。(5).免疫双荧光标记法检测结果与免疫组化检测结果相合,显示Survivin与Ki-67在正常子宫内膜组织均有阳性表达,在正常子宫平滑肌组织无阳性表达,在普通型组、富于细胞型组、肉瘤组的表达均呈逐渐增高趋势,且二者在部分区域共表达。结论:(1). Survivin在正常子宫肌层组织中没有表达,在普通型子宫平滑肌瘤中表达较低,在恶性平滑肌肉瘤中表达显著增高,而在富于细胞型平滑肌瘤中的表达率介于良恶性之间,表明Survivin可能在良、恶性子宫平滑肌肿瘤的发生发展过程中均发挥重要的作用,而在恶性平滑肌肉瘤的发生发展过程中发挥更为重要的作用。(2). Caspase-3在子宫正常平滑肌组织、普通型平滑肌瘤、富于细胞型平滑肌瘤、平滑肌肉瘤中的表达率逐渐下降,在平滑肌肉瘤中表达率显著下降,且与Survivin的表达呈显著负相关,表明Survivin可能通过抑制Caspase-3的活性来发挥其凋亡抑制作用,二者联合检测可能有助于子宫平滑肌肿瘤之间的鉴别诊断,有助于子宫平滑肌肉瘤的早期诊断。(3). Ki-67在正常子宫平滑肌组织中没有表达,在子宫普通型平滑肌瘤、富于细胞型平滑肌瘤中表达均较低,而在子宫平滑肌肉瘤中的表达显著增高,表明Ki-67在子宫富于细胞型平滑肌瘤与子宫平滑肌肉瘤之间的鉴别诊断中具有重要的意义。(4). Ki-67和Survivin的表达在富于细胞型组和肉瘤组均呈显著正相关,表明在这两组子宫平滑肌肿瘤的形成过程中凋亡被抑制,增殖活性增高,凋亡与增殖的平衡被破坏。(5).免疫荧光双标记法与免疫组化法所得结果相符,将免疫荧光双标记法与激光扫描共聚焦显微镜相结合可直观显示两种标记物的共表达情况,在科学研究中具有重要的意义。