【摘 要】
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该试验是作物基因工程的一部分,目的是将由玉米MAR分别置于nptⅡ及gus基因的两侧(MAR-nptⅡ-gus-MAR)或置于gus基因的两侧(MAR-gus-MAR),转化烟草,比较几种构建方式下MAR对gu
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该试验是作物基因工程的一部分,目的是将由玉米MAR分别置于nptⅡ及gus基因的两侧(MAR-nptⅡ-gus-MAR)或置于gus基因的两侧(MAR-gus-MAR),转化烟草,比较几种构建方式下MAR对gus基因表达水平和个体表达水平差异的影响,为基因工程改良作物品种提供调控元件.将玉米adh1 5MAR亚克隆到pUC上得到了pUMI,构建了五种MAR不同放置方式的植物表达载体pDZ、pWZ、pWF、pNZ、pNF.经遗传转化获得了转基因烟草植株,通过组织化学检测选出GUS表达阳性的植株,经PCR检测、PCR-Southern、基因组DNA Southern杂交证明MAR和gus已整合到烟草基因组中.以组织化学法分析GUS短暂表达,表明MAR对GUS的短暂表达无影响,说明MAR需整合进染色体后才能起作用.通过对转基因烟草植侏GUS表达的定量检测和统计分析,研究了玉米adh15MAR对转基因表达水平的影响.该论文较系统地研究了玉米adh1 5MAR不同构建方式对外源基因表达的影响,据他们所知目前在文献中尚未见报道.鉴于pWZ表达载体有显著提高外源基因表达的作用,故该表达载体可在今后植物基因工程中应用,以提高转基因植物中抗病、抗虫等目的基因的表达.
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