人参皂苷和苷元对人参根部病菌的趋化作用研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:bluelee530
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人参(Panax ginseng C.A.Mey.)为五加科草本植物。连作障碍在栽培人参的历史上一直是限制人参产业发展的重要原因之一,引起连作障碍的原因错综复杂。所以,本文从人参类皂苷对人参根部病菌的趋化作用着手,为解决人参的连作障碍及人参的种植提供理论基础。研究结果如下:1)探究人参根腐菌、人参锈腐菌对人参二醇型苷元、原人参二醇型苷元、Re和Rd的化学趋向性响应。人参二醇型苷元、原人参二醇型苷元对人参锈腐菌和人参根腐菌的最佳趋化条件均为,浓度5 mg/L、趋化pH为7、趋化温度为25℃、趋化时间为4天。Re对人参锈腐菌的最佳趋化条件为浓度50 mg/L、趋化pH为6、趋化温度为25℃、趋化时间为4天。Re对人参根腐菌的最佳趋化条件为浓度0.5 mg/L、趋化pH为7、趋化温度为25℃、趋化时间为4天。Rd对人参根腐菌和人参锈腐菌的最佳趋化条件为浓度5 mg/L、趋化pH为8、趋化温度为25℃、趋化时间为4天。在最佳趋化浓度、趋化温度和趋化pH下,人参二醇型苷元、原人参二醇型苷元、Re和Rd对人参锈腐菌的孢子萌发率分别为80.33%、81.67%、76.67%、70.33%;最佳CMI分别为1.1300、1.1300、1.0568、1.0466;菌丝干重分别为0.3722、0.3967、0.2867、0.2833 mg/mL。对人参根腐菌的孢子萌发率分别为80.00%、74.33%、75.33%、78.00%;最佳CMI分别为1.1533、1.2000、1.0690、1.0994;菌丝干重分别为0.3133、0.3344、0.2578、0.2633 mg/mL。2)研究人参总皂苷、人参二醇型苷元、原人参二醇型苷元、人参皂苷Rd和人参皂苷Re对细菌性软腐菌趋化性影响。在趋化浓度为5 mg/L时,人参总皂苷、人参二醇型苷元和原人参二醇型苷元对细菌性软腐菌具有最强的趋化作用;而在趋化浓度为0.5 mg/L时,Rd和Re对细菌性软腐菌具有最强的趋化作用;在趋化pH为7时,人参二醇型苷元、原人参二醇型苷元和Re对细菌性软腐菌具有最强的趋化作用;而在趋化pH为8时,人参总皂苷和Rd的趋化作用最强;在所考虑趋化温度和趋化时间的范围内,30℃和60 min均为这5类趋化液对细菌性软腐菌的最佳趋化温度和最佳趋化时间。3)研究通过人工培养细菌性软腐菌的方式,对多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、纤维素酶(CX)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)进行提取并测定其活性。结果表明细菌性软腐菌对人参的侵染过程中5种细胞壁降解酶均有产生,且人工培养细菌性软腐菌所产生的细胞壁降解酶的活性情况具有较大的差距。推测有可能因为趋化液影响了细胞壁降解酶的活性。4)研究表明,软腐菌对照(CK)处理组,细菌性软腐菌只有轻微的空化现象,并且在电镜图中观察到了其繁殖状态,而软腐菌+人参皂苷处理组(A)和软腐菌+人参皂苷元处理组(B)均具有较重的空化现象,并且在电镜图中均无观察到繁殖状态。软腐菌+人参皂苷元处理组(B)有不明物质溢出,并且细菌菌体变的细长,因此,得出较高浓度的人参皂苷元和人参皂苷对细菌性软腐菌具有不利影响,且人参皂苷元对细菌性软腐菌产生的不利影响大于人参皂苷。5)对不同趋化液处理的细菌性软腐菌菌体及细菌性软腐菌培养液,进行了GC-TOF-MS的测定。对细菌性软腐菌菌体的检查中,共检查出981个峰,明确其物质并且定性可靠的前提下(Similarity>700),其中软腐菌+皂苷元处理组(B)不含有的物质有1种,软腐菌对照(CK)处理组不含有的物质有4种;在通过GC-TOF-MS测定的细菌性软腐菌培养液的测定结果中,共检查出492个峰,明确其物质并且定性可靠的前提下(Similarity>700),其中软腐菌对照(CK)处理组不含有的物质有1种。
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