利格列汀应用于牙髓血运重建术的探索性研究

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研究目的:本研究通过对非糖尿病大鼠下颌磨牙进行牙髓血运重建术,并全身应用DPP-4抑制剂利格列汀,观察其对动物空腹血糖和体重的影响,以及利格列汀的应用对外周血和根管内SDF-1的含量和牙髓血运重建后牙髓组织再生的影响,为探索牙髓血运重建术的生理机制以及DPP-4抑制剂在组织修复与再生领域中使用的可行性和安全性提供科学依据。研究方法:SPF级雌性SD大鼠随机分为三组:(1)实验组:下颌第一磨牙行牙髓血运重建术并灌胃利格列汀;(2)对照组:下颌第一磨牙行牙髓血运重建术并灌胃羧甲基纤维素钠;(3)空白组:下颌第一磨牙不作处理仅灌胃羧甲基纤维素钠。分别在实验前及灌胃后7天、14天、21天和28天检测大鼠空腹血糖及体重值;分别在牙髓血运重建术后24小时、4天、7天、14天和21天收集大鼠心尖血后处死收集下颌骨,试剂盒法检测外周血DPP-4活性和SDF-1含量,HE染色观察根管内新生组织形态及免疫组织化学染色半定量根管内SDF-1的表达量。实验结果:1、三组大鼠的空腹血糖及体重值在各个时间点之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。2、与对照组和空白组相比,实验组血清DPP-4活性在各个时间点均较低(P<0.05);而实验组血清SDF-1含量仅在24小时、4天和7天高于其他两组(P<0.05),第14天和21天三组的差异均无统计学意义(P>0.05)。3、HE染色结果显示,实验组和对照组之间根管内的组织结构无明显差异。牙髓血运重建术后24小时和4天,根尖周及根管内均充满大量炎症细胞、红细胞及红色基质样结构组织;第7天时仍可见较多炎症细胞及基质样结构,并从根尖周延伸到根管内;术后第14天和21天,炎症细胞变少,红色基质样组织染色变淡且连接成空泡状或网状结构,其间未见完整细胞结构。空白组根尖孔闭合,无或极少炎症细胞浸润,根管壁可见一层栅栏状排列的成牙本质细胞,牙髓中央可见成纤维细胞及血管,且各个时间点组织结构变化无明显差异。4、免疫组化染色结果显示,牙髓血运重建术初期,实验组及对照组根管内可见SDF-1在炎症细胞及血小板或红细胞中高表达,随着时间的延长炎症细胞及红细胞或血小板减少,SDF-1表达逐渐减弱;空白组可见SDF-1在成牙本质细胞及成纤维细胞中高表达,且各个时间点表达无明显差异。免疫组化统计结果分析显示,实验组根管内SDF-1的表达量在24小时和第4天与其他两组无明显差异(P>0.05),而在第7天、14天和21天,实验组与对照组也无明显差异,但均低于空白组(P<0.05)。结论:1、在本研究的时间范围内,每公斤体重3mg剂量的DPP-4抑制剂利格列汀对正常动物的血糖与体重无明显影响。2、牙髓血运重建术后7天内,应用DPP-4抑制剂利格列汀可使外周血中SDF-1的含量增高,但其对根管内SDF-1表达的影响不明显。3、牙髓血运重建术后根管内的新生组织缺乏细胞结构,未形成理想的类牙髓组织。4、SDF-1的浓度梯度变化是趋化体内干细胞归巢到根管内参与牙髓再生的重要因素,本研究结果显示利格列汀可间接提高外周血中SDF-1的浓度,该浓度的提高是否对根尖损伤所触发的以损伤部位为中心SDF-1浓度最高,向外延伸浓度逐渐降低的梯度变化有所影响仍然未知,而有待进一步深入研究。
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