“天人相应”体现了中医学的整体观思想,提出人与自然是一个有机的整体,自然界的变化能够影响人的生理功能和病理变化,而人在长期的进化过程中也形成了适应自然气候变化的生理功能特点。“脾恶湿”是中医脾藏象的重要生理特性,它隐含了中医脾的功能受自然界湿因素影响的内涵。目前对于“脾恶湿”这一生理特性的认识还主要集中在临床的现象观察,对其内在机理的探讨尚不明确。因此,本研究一方面根据“五脏应时”的理论,从自然气候变化的角度,观察湿热的长夏季节对消化道免疫功能的影响；另一方面,通过人工控制湿因素,观察湿因素对胃肠道菌群的影响,进而部分揭示“脾恶湿”的生理机制。1.目的通过观察在中医五季下大鼠空肠、回肠和结肠分泌白细胞介素2(Interleukin-2, IL-2)、白细胞介素10(Interleukin-10, IL-10)量的不同,以揭示人体肠道适应季节气候变化的规律。另外,通过人工控制湿度,观察大鼠空肠、回肠和结肠的大肠杆菌(Escherichia Coli, E.coil)、乳酸杆菌(Lactic Acid Bacteria, LBA)和双歧杆菌(Bifidobacterium, BFB)的菌落数,进而阐述湿因素对肠道的影响,为中医“脾恶湿”理论提供实验依据。2.方法2.1文献整理与研究采用文献学、逻辑分析等方法归纳总结了“脾恶湿”的相关中医理论和现代研究以及肠道微生物的相关理论和研究。2.2实验研究2.2.1中医五季气候对各肠段免疫因子的影响(1)实验动物及分组：分别在春分、夏至、秋分、冬至的前37d,以及立秋的前38d,购入12只SD雄性大鼠,随机分为正常组和松果腺摘除模型组,每组各6只。模型组分别于春分、夏至、秋分、冬至的前30d以及立秋的前31d实行松果腺摘除术,与正常组动物在相同条件下饲养一个月,分别至春分、夏至、立秋的前一天(长夏)、秋分、冬至进行实验取材。(2)饲养条件：自然光照,室温(冬季存在供暖,温度(18±1)℃,其他未有人工干预,保持与外围环境气候一致)。自由摄取水及饲料,饲料为普通鼠全价颗粒饲料。(3)实验方法：用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠空肠、回肠和结肠的IL-2和IL-10水平。2.2.2人工控制湿度实验对肠道大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的影响(1)实验动物及分组：将SD雄性大鼠随机分为常温常湿组、常温高湿组、常温低湿组,每组各6只。(2)饲养条件：温度控制在(25±1)℃,常湿控制在湿度(60±5)%,低湿控制在湿度(30±5)%,高湿控制在(90±5)%,喂普通饲料。(3)实验方法：分别在相应的模拟气候条件下饲养21天后,取空肠、回肠和结肠上端5cm肠段,在4m1的生理盐水中涮洗,取得样品液体4m1。分别进行大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌选择性培养,然后平板法计数3.结果3.1中医五季气候对各肠段免疫因子的影响正常组大鼠的空肠IL-2和IL-10分泌水平均在长夏季节最高,比其他四个季节有较为明显的差异(P<0.01)；回肠表现在长夏和冬季较高,IL-2和IL-10分泌水平均较春、夏、秋这三个季节显著性升高(P<0.01,或P<0.05)；结肠表现为在冬季的IL-2和IL-10含量明显高于春季、夏季、长夏和秋季这四个季节(P<0.01)。松果腺摘除后,各个肠段IL-2和IL-10分泌的正常季节气候节律均出现了紊乱。3.2人工控制湿度实验对肠道大肠杆菌、乳酸杆菌和双歧杆菌的影响常温高湿组大鼠的空肠和结肠中大肠杆菌与常温常湿组的比较,菌落值明显升高(分别为P<0.01,P<0.05)；常温低湿组大鼠的空肠乳酸杆菌比常温常湿组的明显升高(P<0.01)；常温低湿组的空肠、回肠和结肠的双歧杆菌均比常温常湿组的有非常明显地升高(分别为P<0.001,P<0.01,P<0.01)；常温高湿组的结肠双歧杆菌的菌落值有较为明显地升高(P<0.05)。4.结论空肠、回肠和结肠的IL-2和IL-10分泌水平具有明显的季节气候节律性变化,尤其是在长夏季节这种湿热气候,空肠和回肠IL-2和IL-10的分泌含量明显高于其他季节,这在一定程度上也为中医“脾应长夏”,“脾恶湿”的生理特性提供了实验依据。松果腺所介导的光周期变化也参与了肠道适应季节变化的调节过程,这一结果补充和完善了传统观点对肠道功能调节机制认识,即传统观点认为肠道的节律变化主要与进食等因素有关,而与松果腺的关系不密切。外环境湿度对机体肠道内环境有明显的影响作用。高湿度更有利于大肠杆菌的繁殖,不利于机体健康；低湿度更有利于乳酸杆菌和双歧杆菌的繁殖,有益于机体健康。而机体不同肠段对外界湿度改变的反应敏感度有所不同,空肠更为敏感。本实验在一定程度上为中医“脾恶湿”的生理特性提供了实验依据。