高转移性胃癌细胞核酸适配体的筛选及验证

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背景胃癌是消化系统的常见的恶性肿瘤,转移与侵袭是患者死亡的主要原因。在中国,大多数胃癌患者在确诊时已经发生了转移。由于胃癌主要通过淋巴结转移,因此及时准确的判断有无淋巴结转移对于胃癌的治疗方式选择及预后评价至关重要。目前对于胃癌的早期转移仍然缺少有效的手段。核酸适配体是近年来在肿瘤诊断与治疗领域已经成为研究热点,目前尚无针对高转移胃癌细胞核酸适配体报道,本研究欲利用cell-SELEX技术来筛选针对高转移性胃癌细胞核酸适配体。目的利用cell-SELEX技术在体外筛选针对高转移性胃癌细胞HGC-27核酸适配体。方法以高转移性胃癌细胞HGC-27为靶细胞,以无转移能力胃癌细胞AGS为反筛细胞,利用Cell-SELEX技术逐轮次筛选,筛选能够与HGC-27特异性结合的核酸适配体。利用流式细胞仪检测及激光共聚焦显微镜分析挑选的核酸适配体的生物学性质。结果1.经11轮筛选得到一条能够命名为LW-25的核酸适配体。该适配体可以与靶细胞高亲和力与高特异性结合。2.核酸适配体LW-25与靶细胞HGC-27结合的位点可能为蛋白质。3.核酸适配体LW-25在胃癌组织芯片中识别转移性胃癌组织具有较强特异性与敏感性。结论本研究利用cell-SELEX技术成功识别出识别高转移胃癌细胞的核酸适配体LW-25,初步鉴定其靶点为蛋白质,为以后胃癌早期转移诊断,精准定位以及转移性胃癌靶向治疗奠定了一定基础。
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