PET/MRI双模态探针的构建及其在肺癌早期诊断中的应用研究

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肺癌是世界范围内发病率和死亡率最高的癌症,主要原因是肺癌难以实现早期、特异的诊断。近几年,将正电子计算机断层扫描成像(PET)与核磁共振成像(MRI)融合的技术取得了长足的发展。相比于CT,MRI具有良好的软组织对比性。因此,PET/MRI融合,在保持 PET诊断原有高灵敏的条件下,其对软组织疾病诊断的准确性和分辨率得以大大提高。因此,PET/MRI融合为肺癌的早期诊断提供了强有力的手段。  目前,临床用正电子发射核素主要是18F,而磁共振造影剂主要是具有磁共振正造影(T1造影)效果的钆剂和具有负造影(T2造影)效果的铁氧化物纳米颗粒。用于肺癌早期诊断,磁共振正造影剂具有优势。但钆剂具有长期毒性,而铁氧化物纳米颗粒生物相容性良好,且当其粒径较小时,铁氧化物纳米颗粒亦具有正造影效果。同时,αvβ3受体在肿瘤新生血管高表达,EGFR在非小细胞肺癌细胞高表达,靶向这两种受体能够提高非小细胞肺癌诊断的特异性。  因此,本论文的研究主要有四部分:超小粒径铁氧化物纳米颗粒的制备;PET/MRI双模、能够同时靶向肿瘤新生血管和 EGFR的探针的构建;探针受体特异性研究及探针体内影像学初步评估。  通过多元醇法制备了粒径在6.8 nm~32.5 nm间可控的磁性氧化铁纳米颗粒。其中6.8 nm的颗粒r2/r1值为3.93,可用于T1造影,32.5 nm的颗粒r2弛豫率为409.8 mM-1·s-1,可用于T2造影。以此为基础,以超小粒径、超顺磁性铁氧化纳米颗粒(USPIO)作为载体,用点击化学的方法在颗粒表面分别进行靶向肿瘤新生血管细胞的RGD小肽、靶向肺癌表皮细胞的GE11小肽的修饰及[18F]核素的标记。建立放射性核素[18F]在颗粒上稳定、快速、高效的标记方法,经衰减校正后的放射产率为29.6%,[18F]标记纳米颗粒的放射化学纯度>92%,放射性稳定性>95%。  以高表达αvβ3受体的A231细胞和高表达EGFR的H1299细胞评价非放射性的[19F]标记探针的特异性,探针的特异结果表明:19F-RGD@USPIO可靶向A231细胞,19F-GE11@USPIO可靶向H1299细胞,双靶向探针19F-RGD-GE11@USPIO的靶向性优于单靶向探针。  磁共振成像表明:19F-RGD@USPIO可特异性靶向肿瘤组织,并提高肿瘤组织的磁共振信号。19F-GE11@USPIO和19F-RGD-GE11@USPIO由于修饰后团聚,粒径增大,T1造影效果减弱,对肿瘤部位信号的增强效果不明显。  PET成像评价放射性[18F]标记颗粒的体内行为:18F-USPIO颗粒的血液半衰期为35 min,18F-USPIO颗粒通过尾静脉注射30 min后,大部分被肝和肾摄取,通过尿液和粪便代谢出体外,而肌肉、脑部、骨骼部位无明显信号,说明无明显的[18F]离子和[18F]2-氟叠氮乙烷从颗粒上脱落,18F-USPIO在体内具有很好的放射性稳定性。
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