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动物性食品中的兽药残留是全世界关注的重要食品安全问题之一。兽药在动物性食品中的残留不仅直接危害人体健康,且容易诱导细菌产生耐药性。喹诺酮类药物(Quinolones, QNs)是目前在畜牧业应用最为广泛的一类广谱抗菌药物,发展可靠、高效的QNs检测方法来监控动物性食品中QNs的残留,对保障食品安全具有重要意义。荧光偏振免疫分析(Fluorescence Polarization Immunoassay, FPIA)是一种均相的免疫分析方法,具有简单、可靠、快速和高效的特点,可满足未来残留筛选检测方法对高通量、高速度、多残留和自动化的发展趋势。本研究以QNs为主要研究对象,以FPIA技术为研究手段,分别建立了检测动物性食品中奥比沙星(Orbifloxacin, ORB)、恩诺沙星(Enrofloxacin, ENR)单残留和QNs多残留的FPIA检测方法。同时还研究了基于多重标记技术的FPIA方法,来同时检测牛奶中链霉素(Streptomycin, STR)、磺胺噻唑(Sulfathiazole, ST)、ENR和头孢氨苄(Cephalexin, CEP)四种不同类抗菌药物的残留。通过在ORB分子的C3位羧基偶联不同长度间隔臂的氨基化荧光素制备了三种ORB荧光标记物ORB-EDF、ORB-BDF和ORB-HDF;并以同样的方法制备了三种洛美沙星(Lomefloxacin,LOM)荧光标记物LOM-EDF、LOM-BDF和LOM-HDF;3种ENR荧光标记物ENR-5-AF、 ENR-4’-AMF和ENR-BDF。通过在5种QNs分子的7位哌嗪分别偶联异硫氰酸荧光素(FITC)合成了相应的荧光标记物CIP-FITC、NOR-FITC、ENO-FITC、LOM-FITC和SAR-FITC;通过在沙拉沙星(Sarafloxacin, SAR)的7位哌嗪分别与4种氨基活性荧光素偶联,合成了4种SAR荧光标记物SAR-5-FAM、SAR-6-FAM、SAR-DTAF和SAR-GAF。通过最佳荧光标记物LOM-BDF与ORB的单克隆抗体组合建立了检测牛奶中ORB单残留FPIA方法。方法的检测限为3.7ng mL-1,添加空白牛奶的平均回收率为74.3～112%,变异系数为7.4～26.8%。以最佳荧光标记物ENR-4’-AMF与ENR单抗组合建立了检测鸡肉中ENR单残留FPIA方法。检测限为2.4ng mL-1,空白鸡肉样本中添加ENR的平均回收率为74.4～79.5%,变异系数为8.6～15.6%。通过最佳荧光标记物SAR-5-FAM与QNs广谱识别性单克隆抗体制备了免疫复合物单试剂,建立了可同时检测牛奶中5种QNs(包括环丙沙星、ENR、氟甲喹、麻保沙星和达氟沙星)和鸡肉中6种QNs(包括环丙沙星、ENR、恶喹酸、氟甲喹、达氟沙星和二氟沙星)残留的单试剂FPIA方法(Single-Reagent FPIA, SR-FPIA)。本方法具有灵敏度高且反应速度快的特点,只需将样品与单试剂充分混合后便可直接检测,无需进一步温育。该方法对牛奶中5种QNs的检测能力(Detection capability,CCβ)均小于15ng mL-1;对鸡肉中6种QNs的CCβ均小于50ng mL-1。添加空自牛奶和鸡肉样本的平均回收率为77.8～116%,变异系数低于17.4%。同时,还研究了基于多重多标记技术的荧光偏振免疫分析方法,建立了四色标记荧光偏振免疫分析(Quad-fluorophore FPIA)方法来同时检测ST, ENR和CEP四种不同类抗菌药物在牛奶中的残留。空白牛奶中同时添加四种抗菌药物,经共同提取后,可实现在同一个检测孔中同时检测,从而大大提高兽药残留筛选检测的效率。