研究目的:感染性休克是临床常见的急危重症,其发病原因多是由革兰氏阴性菌的入侵引起。革兰氏阴性菌侵入机体后刺激免疫系统,使细菌被分解产生内毒素(Lipopolysaccharide,LPS)及其其它结构成分。LPS进入机体循环系统后引起全身性炎症反应,严重时可引起休克。感染性休克发展过程中常伴随着多种并发症,急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)是其中之一。感染性休克发病机制复杂,感染后由炎症介质引起的全身性炎症反应是得到认可的机制之一。LPS等感染源侵入机体导致巨噬细胞和单核细胞在相关部位聚集,产生炎症因子并引发炎症反应。核因子KB(Nuclear FactorκB,NF-κB)信号通路的主要功能是参与炎症反应,多种炎症因子如肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNFα)和高迁移率族蛋白 B1(High Mobility Group Box-1,HMGB1)的表达都受到其调控。实验发现在内毒素引起的急性肺损伤前期阶段,早期炎症因子如TNFα介导的炎症级联反应是引起肺组织损伤的原因,因此临床上有针对早期炎症因子的治疗方案,取得了一定的治疗效果。但是当感染进一步发展,针对早期炎症因子的治疗效果不佳,而针对晚期炎症因子如HMGB1的治疗方案疗效显著。过氧化物酶体增殖物激活受体γ((peroxisome proliferator-activated receptor y,PPARγ)是一个核内受体超家族,早期发现其主要功能是调节糖脂代谢,随后的研究发现PPARγ还具有免疫调节的功能。PPARy信号通路通过调控相关炎症因子的表达发挥免疫调节功能,具体机制和NF-κB相关。中药牡丹皮为毛茛科植物牡丹干燥根皮,性苦、辛,微寒,归心、肝、肾经,具有清热凉血、活血化淤、退虚热等功效,常和其他药物配伍发挥清热凉血功效。前期实验发现牡丹皮和其他药物配伍能够治疗感染性休克,其作用机制与丹皮酚调节PPARγ表达有关,但对于内毒素休克的具体作用及作用机制尚不明确。本研究通过建立内毒素休克动物模型,探讨丹皮酚通过调控PPARγ表达来调节炎症反应从而治疗感染性休克大鼠急性肺损伤的机制研究。研究方法:1 药效研究1.1构建内毒素休克大鼠动物模型,用PPARγ抑制剂(T0070907)和地塞米松与丹皮酚对照,观察各组大鼠72h存活率,观察丹皮酚对内毒素休克大鼠存活率的影响;1.2建立内毒素休克动物模型,用PPARγ抑制剂(T0070907)和地塞米松与丹皮酚对照,用BL-420生物机能实验系统监测大鼠的血压指标,观察丹皮酚对内毒素休克大鼠血压的影响;1.3于用药后2、6、12、24h共4个时间点取血清和肺组织,ELISA检测血清HMGB1含量,通过HE染色观察肺组织病理学变化,免疫荧光和Western blot的方法检测肺组织HMGB1和TNFα等相关细胞因子表达情况,观察丹皮酚对内毒素休克大鼠肺组织的保护作用;2 机制研究通过免疫荧光和Western blot的方法检测肺组织PPARγ和NF-KB的表达量和表达位置。研究结果:1.相对内毒素组,丹皮酚使内毒素休克大鼠6h内血压下降速度减慢,同时使内毒素休克大鼠72h存活率上升。2.组织形态学观察发现丹皮酚使内毒素休克大鼠肺组织充血水肿及肺泡炎性细胞的浸润程度减轻。3.丹皮酚使内毒素休克大鼠血清HMGB1浓度降低。4.丹皮酚降低肺组织中TNFα和HMGB1等炎症因子的表达,抑制HMGB1由细胞核内向核外转移。5.丹皮酚增强肺组织中PPARγ的表达,抑制NF-κB的表达及核转位。研究结论:1丹皮酚提高内毒素休克大鼠的存活率,减缓血压下降速度,减轻肺组织损伤程度,同时使血清HMGB1和肺组织中炎症因子TNFα和HMGB1的表达量下降,抑制HMGB1的核转位。2丹皮酚上调肺组织PPARγ的表达,同时下调NF-κB的表达和抑制NF-κB的核转位。3丹皮酚通过促进PPARγ的表达同时抑制NF-κB和相关炎症因子的表达及核转位发挥治疗效果,对内毒素休克大鼠肺组织损伤起到保护作用。