目的：观察神经再生素(NerveRegenerationFactor，NRF)对体外培养大鼠海马神经元生长的促进作用，初步探讨NRF促神经生长的作用机制。 方法： 1、以体外原代培养的胎鼠海马神经元为研究模型，通过相差显微镜采用Scion软件，测量不同浓度NRF(0.25，0.5，1.Oμg/m1)作用不同时间(6h，12h，24h)对海马神经元神经突起生长的影响。 2、胎鼠海马神经元加药6h后，分别提取对照组(DMEM基础培养基)和加药组(1.0p.g/mlNRF)细胞总RNA，经逆转录生成生物素标记的cRNA，纯化和片段化处理后与GeneChip~RatGenome2302.0Array芯片(Affymetrix公司)杂交，洗脱后芯片扫描，数据处理，观察NRF对海马神经元基因表达的影响。 3、通过实时荧光定量PCR观察NRF不同浓度(0.25，0.5，1.01ag/m1)及不同作用时间(6h，12h，24h)对海马神经元生长相关蛋白.43(GrowthassociatedProtein-43)基因表达的影响；以goatanti.GAP-43polyclonalantibody为一抗，donkeyanti-goatIgG为二抗，采用免疫荧光细胞化学法和Westernblot观察，不同浓度NRF(0.25，0.5，1.Ogg/m1)加药24h后，对海马神经元GAP-43表达的影响。 结果： 1、Scion软件测量和统计结果显示，NRF具有促进体外培养的胎鼠海马神经元突起生长的作用，在所观察的剂量范围内，随着药物浓度的增加，作用逐步增强，至1μg/ml达峰值，随着加药时间的延长，作用逐步增加，至24h时，作用最明显。 2、Aflymetrix大鼠全基因组芯片分析结果表明，检测的15866个基因中，248个基因上调，316个基因下调，其中25个上调和47个下调基因有显著性差异表达。这些差异表达的基因，有G蛋白偶联受体、信号转导分子、细胞组分、生物过程生长代谢调控因子、免疫蛋白、酶和凋亡的调控因子等。 3、实时荧光定量PCR结果提示，NRF能使体外培养的海马神经元GAP-43基因表达上调，1txg/mlNRF加药后6h开始与阴性对照组差异有统计学意义；免疫荧光细胞化学和Westernblot结果提示，NRF能使体外培养的海马神经元GAP-43蛋白表达上调，NRF浓度为1.01xg/ml时作用最强。 结论 1、NRF具有促进体外培养大鼠海马神经元神经突起生长的作用，且这种作用呈现剂量相关和时间依赖性。 2、NRF对海马神经元的促生长作用与其对相关基因的调控有关。 3、NRF能增加体外培养大鼠海马神经元GAP-43及其基因表达。