基于石墨烯量子点荧光印迹传感器的构建及其对牛奶样品中土霉素的识别与检测研究

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抗生素作为一类抗菌化合物被广泛用于人类医学和兽医学中,以治疗许多传染性疾病。但不加区分地施用抗生素可能对人类健康和动物源性食品生产产生影响。而土霉素(Oxytetracycline,OTC)是四环素家族中的至关重要的广谱抗生素之一,由于其高效和低成本而成为世界上使用最早、最广泛的四环素类抗生素,常被用于畜牧业中以促进生长和治疗疾病。然而,当人体内含有过量的OTC残留时,会出现身体不适,甚至导致骨骼畸形和生长抑制。此外,OTC也可能会在生物链中不断积累。自然环境中微量的抗生素残留可能会对微生物的生长和繁殖产生严重影响,从而促进细菌的抗药性,对人类的健康构成了一定的威胁。因此,建立简便快捷的OTC检测方法刻不容缓。荧光分析法因其快速高效的优势而被科研学者广泛用于检测各种目标分子。当荧光分析法与分子印迹技术相结合时,能够明显提高荧光分析法的高效选择性,为目标分子的检测提供了更为广阔的平台。利用分子印迹技术(Molecularly Imprinting Technology,MIT)能够合成分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Polymers,MIPs),模板分子通过共价键或非共价键与功能单体结合,在交联剂的作用下形成了三维网络结构。去除模板分子后,获得与模板分子相匹配的特定印迹三维空腔。荧光分析法与分子印迹技术的结合构成了具有高选择性、高灵敏度特点的荧光印迹传感器。因而在本论文中,采用荧光印迹传感器对于牛奶样品中OTC的识别与检测进行了分析。具体研究内容如下:1.通过与微波法、热解法的对比,发现采用水热法一步合成的石墨烯量子点(GQDs)分散性好,荧光强度高。由一水柠檬酸和谷胱甘肽作为反应原料,有效的掺杂了氮和硫两种元素。同时,将分子印迹技术与荧光传感器相结合构建荧光印迹传感器,实现了对OTC的高灵敏、高选择性识别,检测限(LOD)低至0.6 nM。在加标回收实验中,回收率为99.67-100.65%。2.通过引入红色CdTe QDs作为参考信号,以GQDs为响应信号,采用沉淀聚合法构建了比率荧光印迹传感器。其中分别将OTC、MAA、AIBN和EGDMA作为模板分子、功能单体、引发剂和交联剂。通过不同浓度的OTC溶液的加入,比率荧光印迹传感器展现出了良好的线性变化关系。在OTC浓度为0-80μM范围内,LOD低至3.5?nM,在牛奶样品中OTC的回收率99.93-100.28%,相对标准偏差(RSD)为3.46-4.65%。同时,荧光颜色展示了由蓝色变为红色的渐变过程,成功地实现了对OTC的可视化检测。3.将黄色CdTe QDs替代红色CdTe QDs构建类白色比率荧光传感器以实现对OTC的灵敏可视化检测。以GQDs为响应信号,通过分子印迹技术,采用二氧化硅为基体材料,得到了形貌较好的印迹聚合物。与其他抗生素进行实验对比,比率荧光印迹传感器展现出了对OTC的高效选择性识别。LOD低至1.4?nM。此外,加标回收实验的回收率为99.82-100.04%,RSD为2.33-4.12%。由蓝色到类白色到黄色的荧光变化过程展示了该比率荧光传感器对牛奶样品中OTC的可视化检测效果。
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