利用转基因植物研制新型口蹄疫基因工程亚单位疫苗

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为研究口蹄疫病毒(FMDV)表面抗原VP1在植物中的表达,分离克隆了“O”型FMDV表面抗原VP1基因,以马铃薯块茎特异性表达的Patatin启动子分别构建了2个植物双元表达载体pBIVP和pBICVP。pBIVP含有Patatin启动子和马铃薯蛋白酶抑制子基因Ⅱ(Pin2)的3’末端非翻译区(UTR)序列,在VP1基因的末端融合了编码内质网滞留信号肽(SEKDEL)核苷酸序列;pBICVP中除了含有Patatin启动子和Pin2的3’末端非翻译区外,在VP1的5’端融合了霍乱毒素B亚基基因(CTB),3’末端融合了编码SEKDEL酸序列。通过农杆菌介导分别将这2种不同构建的VP1转入马铃薯,获得卡那霉素(Km)抗性的幼苗。PCR检测结果表明VP1已转入马铃薯,转化效率达到95%。
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