目的：采用大鼠脑缺血模型，用HE，Nissl，免疫组化及电镜等方法观察脑缺血后，大脑顶叶皮质神经细胞及突触的变化以及突触体素的表达，旨在探讨脑缺血损伤对突触的影响，从而为探讨脑损伤后突触的重塑及神经元功能的恢复打下基础。 材料与方法：采用健康SD大鼠，雌雄不拘，体重280—300g，由湖北医科大学动物中心提供。参考Zea Longa报道的方法加以改进制成脑缺血模型，取手术成功、症状典型的大鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别于手术后2h、6h、24h、48h取材。乙醚吸入麻醉后快速断头，开颅取大脑顶叶皮质，4％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，用于光镜及免疫组化研究。电镜标本用2.5％戊二醛固定，锇酸后固定，树脂包埋，超薄切片，电镜观察。 结果：1、HE及Nissl染色：对照组大脑顶叶皮质的神经元分布呈层状，从皮质浅层至深层依次可分为分子层、外颗粒层、外锥体细胞层、内颗粒层、内锥体细胞层和多型细胞层。各层神经元排列整齐，细胞数量多，形态完整，胞核大而明显，常可见一明显的核仁；胞核和核仁被染成兰色，胞浆呈浅粉红色。缺血2h，病理变化不明显；缺血6h，大脑顶叶皮质神经元病理损伤程度轻，表现为胞体肿胀，尼氏体边聚，甚至溶解消失，胞质内出现小空泡或颗粒变性；缺血24h，可见神经元广泛性损伤，表现为大脑皮质正常结构破坏，细胞排列散 中文摘要乱，绷侧莉姻副。，碉－出现空壳区，核酮、深染，胞浆强嗜酸胜：至缺血4m，大量神经元变牲坏死，成堆的神经元丢失，胞核固缩深染成三角形，细胞呈空泡状。2．免疫组化结果2．1、一对姻盘划圆郧拈明济捆测到明显的一阳性神经元：脑缺血后，随着缺血时间的延长，眺蛋白的表达逐渐增强，并且随时间的账，髓o幢。聊Zh，病理变化不明显；聊M，删一，其阳性细胞数为1．26土0．67 （与…比P＜0＊5）；锄Zdri，Ef ＄eE＄g多，其阳一15 ＊2土2．32（与…比P＜0．of）；至缺血48h，孤AslllviAI＃x，WW，AnltI4llllfasre27．93士3．18（与汕昭组相比 P＜0．of）。ER e阳注纲胞主Ktlilt＠＆Hpsl，）la1Kii％！il．w＝l，gis：7＠，lf96（Wps．．s＝，ie。2．2、突触体素：对照组：突椭一点状或颗粒状，肺礁，划懒项，以＊、Illto多；主要分向妇卸空毡内，有些颗粒围绕在神经元周围，蛐出神经元胞体的轮廓；胞浆内颗泣饮勉纽郊刃饨昭以观，白质、血管及胶质细胞不着色，其m顾45．14士3．89。缺血Zh，变化不明显，其o值为43．89士l．78（与对照组相比M．05）。缺血6h，可见突触晰蔚秘妊0狞呀时阶湘沙，密度减低，数量减少，其m值为40．96上4．32（与对照组相比P＜0．05）。缺血24h，突触体敦勉钮勋亦呷嘘糜颓沙，围绕在神经大胞爬周围的阳幽厕猢叫哎为龈，其o顾14．16士2．76（与…比P＜0＊1）；缺血48h，神…空泡状，神经元周围的附注颊泣消失，只有神经元之间可见阳 2 且 中文摘要 性回征哇润箔拒在，其①顾 7．89士2．86（与对照组相比 P＜0．of）。 弓、超微结构的靴： 3．l、神经细胞的靴：对照阻：细胞核圆形，频四，核膜规 整，核仁大而明显，位于中央或近中央；核周质内可见各种细 胞器，粗面崛 砚位于核周，也可散布于核周质各 处，囊池扁平，有胁阂颊姑赃胭搞芮舅鹏滚面，有的单个游 离于胞质屯高尔基复合体发达 弓形，数层扁平囊叠在 一起，周围被众多的大J跄泡圃：线汹喇中J讣筹，圆形、椭 圆形或杆状，峪完整。溶酶体多见，电子密度均一，形状规 则；B瞒硼。缺血后神经细胞发生变牲。缺血m，变化 不明显；咖6h，神经纲胞粗面内质网，高尔基复合体轻度 扩张；线粒体肿胀、峪模糊紊乱。缺血24h，一明 显，神经元固缩，核膜皱折，异染色质增多，核艄失或变 小；粗面内质网、高尔基复合体扩张变形；线粒体膨胀呈空泡 状，峪断裂、溶解乃烈失。缺血48h，神经元固缩更栅， Mh解，t内WM显，kZIBAn？irllSI）13ig 结构，拙现细胞器的丢失，脂褐素增多。 3．2、突触的变化：对照觑：本组神经毡内的突触数目多，在 众多的突触中，多为Gr’n－＊I型，其突触前膜、后膜致密物质较 ：J7lTlllsilviqwe’，＄＄！liiilllajiAnforeryRere，K）giise＄；＄＄！llffllso 拥突獭M购哆，分布密集而均匀，大V此醇，多为圆形清亮 A饱，线粒体丰富。对照辙陕溯廊鹤末缴为20上土＊＊3；随 着缺血时间的延长，神经毡内突触数B逐渐减少，即突触数密 度下降