精液保存是人工授精技术的关键步骤之一。精液保存技术可使精液实现跨区域、跨时间的运输和使用,在很大程度上提高了良种公畜的利用率,也对家畜品种的繁育与改良具有重要意义。目前山羊精液保存最常见的是低温保存,但这项技术仍存在低温保存效果差和时间短的问题。因此,提高山羊精液低温保存效果和延长保存时间,对于推动山羊的良种繁育、增加后代数量意义重大。在精液的低温保存过程中,稀释液配方的不同以及精子发生脂质过氧化反应均会在很大程度上影响精液保存效果。为提高山羊精液低温保存效果,筛选安全稳定的稀释液配方,并寻找对山羊精液低温保存有积极作用的抗氧化剂,本试验首先选取了5种不同的山羊低温保存.稀释液配方,通过对山羊精液稀释并进行低温保存后精液质量的对比,筛选出最优配方;然后以最优配方作为基础稀释液,在其中分别添加10、20、40、60、80 mg/L的苹果多酚以及浓度为10、30、50、70mg/L的葡萄籽原花青素,检测精子活率.、顶体完整率、质膜.完整率、线粒体活性以及总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(.MDA)含量,探讨两种抗氧化剂对山羊精液低温保存的效果;最后联合添加苹果多酚+葡萄籽原花青素不同浓度组合40+0 mg/L、0+30 mg/L、20+10 mg/L、20+30 mg/L、40+10 mg/L、40+30 mg/L,探讨两种抗氧化剂的配伍效应。本研究获得的主要结果如下:1.五种不同配方山羊精液低温保存稀释液经过筛选,“配方2”的保存效果最好。低温保存5 d时,精子活率仍为45.42%,顶体完整率为61.26%,质膜完整率为47.24%,线粒体活性为43.3%,均显著高于其他试验组(P<0.05)。五个配方中精液保存各项指标最低的为“配方1”,其各项指标均显著低于其他试验组(P<0.05)。另外,精子活率与顶体完整率相关性最高,为极显著正相关(r=0.932,P<0.01);精子活率与质膜完整率为极显著正相关(r=0.876,P<0.01)。经对比选择,“配方2”效果最好,可作基础液以供后续试验使用。2.在“配方2”中加入一定浓度的苹果多酚可提高精液保存质量。苹果多酚的最适添加浓度为40 mg/L,保存5 d时精子各项指标均显著大于其余各组(P<0.05),其精子活率可达49.31%,顶体完整率达到66.23%,质膜完整率为49.91%,线粒体活性为49.56%。而80 mg/L试验组保存效果最差,不仅各项指标均低于其余各组,而且保存5 d时精子顶体完整性、线粒体活性、T-AOC三个指标中显著低于对照组(P<0.05)。3.在“配方2”中加入一定浓度葡萄籽原花青素可提高精液保存质量。葡萄籽原花青素的最适添加浓度为30 mg/L,其各项指标(MDA除外)在保存期间均最高,且5 d时精子活率、顶体完整率.、线粒体.活性、T-AOC显著高于其他组(P<0.05),其精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%。而70 mg/L处理组较其他处理组保存质量显著降低(P<0.05)。4.在“配方2”中联合添加不同的浓度苹果多酚+葡萄籽原花青素,结果表明20+10mg/L、20+30 mg/L、40+10 mg/L组均比单一添加组对精液保存质量有不同程度提高。保存效果最好的为20+30 mg/L试验组,保存5 d时精子活率、质膜完整率、顶体完整率、T-AOC均比其他试验组显著提高(P<0.05),且MDA显著下降(P<0.05),精子活率可达56.29%,顶体完整率高达70.03%,质膜完整率为55.20%,线粒体活性为53.53%。在五种稀释液配方中,“配方2”保存效果最佳,5 d时精子活率可达到45.42%,顶体完整率可达61.26%,质膜完整率为47.24%,线粒体活性为43.3%;精子质量检测指标中,精子活率与顶体完整率极显著正相关,精子活率与质膜完整率极显著正相关;苹果多酚与葡萄籽原花青素均能有效提高山羊精子低温保存品质,其中苹果多酚最适浓度为40 mg/L,5 d时精子活率可达49.31%,顶体完整率达到66.23%,质膜完整率为49.91%,线粒体活性为49.56%;葡萄籽原花青素最适浓度为30 mg/L,5 d时精子活率为51.46%,顶体完整率为67.55%,质膜完整率为50.97%,线粒体活性为50.78%;两种抗氧化剂具有协同作用,其中苹果多酚+葡萄籽原花青素最适组合浓度为20+30 mg/L,5 d时精子活率可达56.29%,顶体完整率高达70.03%,质膜完整率为55.20%,线粒体活性为53.53%。