目的:探讨在H<,2>O<,2>氧化处理下,扇贝多肽(Polypeptide from Chlamys farreri)对小鼠胸腺细胞氧化损伤的保护作用及其机制.方法:建立H<,2>O<,2>对体外培养的小鼠胸腺细胞氧化损伤的病理模型.试验设计分为6组:对照组,H<,2>O<,2>模型组,H<,2>O<,2>+0.5%PCF组,H<,2>O<,2>+0.25%PCF组,H<,2>O<,2>+0.125%PCF组和H<,2>O<,2>+0.1%Vc组.台盼蓝拒染法检测细胞存活率;MTT法检测细胞增殖活性;琼脂糖凝胶电泳观察DNA ladder;酶生化法测定胞浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量以及细胞抗超氧阴离子能力(A-ASC)和总抗氧化能力(T-AOC);透射电镜观察细胞超微结构的改变;流式细胞仪PI染色测定细胞凋亡率;Fluo-3-AM荧光染色测定细胞内游离[Ca<2+>]<,i>;罗丹明123(Rhodamine 123)荧光染色测定线粒体膜电位;免疫细胞化学检测细胞P53、Bcl-2、Bax蛋白的表达量;原位杂交检测细胞p21WAF1 mRNA、p38mRNA的基因表达量;结果在12.5 μ M H<,2>O<,2>处理下,PCF在0.125%~0.5%浓度范围内能显著提高小鼠胸腺细胞的活性;抑制H<,2>O<,2>所致胸腺细胞早、中和晚期凋亡的形态学改变,维持细胞的正常超微结构;抑制胸腺细胞DNA梯状带的出现;降低胸腺细胞凋亡率;显著提高胞浆中SOD、GSH-Px的活性,降低ROS、MDA含量,提高A-ASC及T-AOC含量;降低胸腺细胞内游离[Ca<2+>];稳定线粒体膜电位;抑制H<,2>O<,2>处理后小鼠胸腺细胞P53蛋白和Bax蛋白在胞浆中的表达,增强Bcl-2蛋白的表达;同时还可抑制H<,2>O<,2>处理后小鼠胸腺细胞p21 mRNA和p38mRNA的表达.以上统计结果均有显著性差异(P<0.01,P<0.05).结论扇贝多肽能提高体外培养的小鼠胸腺细胞的活性,抑制H<,2>O<,2>氧化所诱导的胸腺细胞凋亡,对H<,2>O<,2>所致氧化损伤的小鼠胸腺细胞具有保护作用.其机制与PCF能清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、降低细胞内游离[Ca<2+>]<,i>、保护细胞膜相结构、减少DNA断裂有关;同时与PCF能抑制突变型P53蛋白和促凋亡蛋白Bax的表达,增强凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达以及抑制p21 mRNA、p38mRNA的表达,影响胸腺细胞凋亡的信号转导中的基因调控有关.