论文部分内容阅读
大苞藤黄（Garcinia bracteata C.Y.Wu ex Y.H.Li）,隶属于藤黄科（Guttiferae）藤黄属植物（Garcinia）,果实可食用。本文采用现代色谱分离技术,结合现代波谱学和量子计算化学等方法,从大苞藤黄果实95%乙醇提取物中分离并鉴定了26个化合物（1-9,10a,10b,11,12,13a,13a?,14-1,14-2,15,16,17a,17b,18a,18b,19a,19b,20）,包含8个多环多异戊烯基间苯三酚衍生物PPAPs（1-8）、3个二苯甲酮衍生物（9,10a,10b,11）、3个新骨架酮（12a,13a,13a?）、4个笼状酮（14-1,14-2,15,16）和7个异戊烯基酮（17a,17b,18a,18b,19a,19b,20）。其中,新骨架化合物9个（1-5,7,12a,13a,13a?）,新化合物8个（6,8,14-1,14-2,17a,17b,18a,18b）。新化合物分别命名为garcibractinone C（1）、garcibractinone D（2）、garcibractinone E（3）、garcibractinone F（4）、garcibractinone G（5）、garcibractinone H（6）、garcibractinone I（7）、garcibractinone J（8）、epi-garcibractinone K（12）、（-）-garcibractinone K（13a）、（+）-garcibractinone K（13a?）、（-）-garcibractinone L（14-1）、（+）-garcibractinone L（14-2）、（-）-garcibractinone M（17a）、（+）-garcibractinone M（17b）、（-）-garcibractinone N（18a）、（+）-garcibractinone N（18b）。化合物1为新颖的6-氧杂三环[7.4.1.11,11]十五烷骨架PPAPs,化合物3则是含5,8-二氧杂三环[4.3.2.03,7]十一烷骨架的PPAPs。1、3经逆克莱森缩合反应发生间苯三酚母核开裂得到化合物2、4,化合物4具有4,6,12-三氧杂三环[6.4.0.01,5]十二烷骨架;化合物5是首次发现的具有3-氧杂双环[5.3.0]癸烷骨架的降解的seco-双环多异戊烯基间苯三酚衍生物（seco-BPAPs）;化合物6是首个经异戊烯基侧链环化,形成带有四氢呋喃环的11-氧杂三环[4.3.1.14,10]十一烷骨架的新PPAPs;化合物7是一个新颖的9-氧杂双环[6.2.1]十一烷骨架PPAPs;化合物8是一个具有四环[4.4.1.11,8.04,12]十二烷骨架的新PPAPs;化合物12,13a,13a?含有7-氧杂三环[3.3.1.06,9]壬烷新颖骨架的酮;化合物14-1,14-2是一对含有C-6位为半缩酮碳的4-氧杂三环[4.3.1.03,7]癸烷骨架的笼状酮。新颖骨架的PPAPs是经逆克莱森缩合反应,由间苯三酚母核开裂产生。另外,化合物5在生物合成途径中经氧化降碳形成,而新骨架酮12,13a和13a?则经脱羧反应产生。化合物1,2,3,4,5,7,12,13a和13a?等新骨架化合物的发现揭示了大苞藤黄果实次生代谢产物的结构多样性,为大苞藤黄果实中PPAPs以及酮类化合物的探索提供了一定的科学依据。黑种草子为毛茛科（Ranuncualceac）黑种草属（Nigella）瘤果黑种草（Nigella glandulifea Freyn et Sint）干燥成熟的种子,我国传统维药,可用于治疗耳鸣健忘,经闭乳少,热淋,石淋等症。本文对黑种草子50%乙醇提取物系统的分离纯化,得11个化合物,采用多种现代波谱技术对化合物进行结构鉴定,包含3个三萜皂苷（21-23）、2个dolabellane型二萜（24-25）、1个无环倍半萜（26）、1个生物碱（27）、1个木脂素（28）、2个酚性成分（29-30）和1个长链脂肪酸（31）。其中,新化合物2个（25-26）,分别命名为8-denicotinoylnigellamine A1（25）、3,7,11-trimethyldodec-10-ene-1,6,7-triol（26）。为阐明黑种草子发挥抗糖尿病活性药效机制,对所分离到的10种化合物（21-30）进行了体外抗糖尿病研究。我们采用CCK-8方法研究了21-30对人肝癌细胞（Hep G2）的毒性作用,并进一步评价了它们对胰岛素抵抗的人肝癌细胞模型（Hep G2/IR）的潜在保护作用。结果表明,化合物21-24、27、28、30能够显著改善胰岛素抵抗细胞糖代谢紊乱现象。由此可见,黑种草子表现的抗糖尿病活性是其含有的生物碱、dolabellane型二萜、木脂素、三萜皂苷、酚性成分等多种结构类型的代谢产物共同作用的结果。最后,对化合物21-30的体外抗肿瘤细胞增殖和抗炎活性进行了评估。结果表明,化合物22显示出一定的抑制Hep G2、T98、A549三种人癌细胞系增殖的作用,IC50分别为14.76±0.44、13.53±0.17和12.96±0.41μM。而化合物21仅显示出对A549人癌细胞系的抑制作用(IC50=9.05±0.32μM)。此外,化合物21、22和28作用于LPS（脂多糖）诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞建立的炎症模型后,表现出一定的抑制NO生成的作用,IC50值分别为9.98±0.26、9.13±0.10、18.99±0.46μM。相关构效关系研究表明,常春藤皂苷的28-COOH在发挥抗肿瘤细胞增殖和抗炎活性中起关键作用,C-3位带有α-L-rhamnopyranosyl-（1→2）-α-L-arabinopyranosyl侧链的皂苷显示出一定的抗炎效力。该结果与文献报道一致,为黑种草子发挥抗肿瘤细胞增殖和抗炎活性的机制研究提供一定的科学参考。