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目的:中药钩藤为茜草科茜草属钩藤Uncaria rhyn.chophylla(Miq.)Jacks、大叶钩藤UncariamacrophyllaWall.、毛钩藤Uncaria hirsute Havil.、华钩藤Uncariasinensis(Oliv.)Havil.或无柄果钩藤Uncaria sessilifm—ctus Roxb.的干燥带钩枝茎。《中国药典》(2010版)收载以上5个品种,在我省主要分布于开阳、剑河、龙里、福泉、遵义、兴义、贵阳、关岭、惠水等地,资源较为丰富。 现行《中国药典》收载的质量标准记载了钩藤药材的形状;鉴别;水分、总灰分、浸出物检查等。由于缺少采用某种药效成分或某类药效成分含量进行质量控制的指标,使得临床上药用钩藤的质量很不稳定,药材市场上钩藤质量参差不齐。因此,为了保证临床用钩藤的质量,首先应研究建立钩藤中某个或某类药效成分的含量测定方法,然后用所建立的含量分析方法对主要产自贵州省的钩藤药材进行质量调查分析,为提升和完善钩藤药材的质量标准,确保临床用钩藤的质量就显得很有必要。 方法:中药钩藤的药效成分为生物碱类,本课题主要通过采用高效毛细管电泳仪、紫外-可见分光光度计建立起钩藤中起主要药效作用的钩藤碱、异钩藤碱和总生物碱的有效测定方法,通过对主要产自贵州省以及在贵州药材市场上流通的钩藤药材进行以上成分测定,同时对贵州周边省份药材市场上的钩藤药材也进行了质量对比分析。我们对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱两成分采用了正交工艺提取条件优选,后采用非水毛细管电泳内标法进行测定;采用紫外-可见分光光度法测定了总生物碱;采用高效毛细管电泳法对贵州钩藤药材进行了HPCE特征图谱研究。 结果:通过对24批次钩藤药材中钩藤碱和异钩藤碱含量测定,结果多数含量很低,大多数均在检测限以下,显然如果采用钩藤碱和异钩藤碱的含量作为检测指标来制定质量标准就有困难。我们采用紫外-可见分光光度法对总生物碱进行了含量测定,并以此作为提升制定钩藤质量标准的参考依据。 通过分析鉴定,在我们采集的钩藤样品中,有部分样品是人工种植,种属关系是明确的,有一部分,虽然均有钩藤所具有的特征钩,由于缺少种属关系特征鉴别指标,但我们通过采用在开阳县人工种植已知种属关系的钩藤HPCE特征图谱对比后得到了确认;然而仍有部分即缺少特征鉴别指标又与已知种属关系的钩藤特征图谱对不上,所以就仍存在某些样品钩藤种属关系不明确的现象。在已经确认的钩藤样品中毛钩藤占多数,少量为华钩藤。根据实验数据初步起草制定了贵州钩藤药材的质量标准。 结论: 1.采用HPCE对贵州钩藤药材市场上钩藤中钩藤碱和异钩藤碱含量测定发现其中不仅绝对含量普遍较低与周边省份样品对比,相对含量也较低。 2.可通过采用紫外-可见分光光度法测定钩藤中总生物碱含量来进行质量控制。 3.在建立钩藤HPCE特征图谱的基础上可采用这样的特征图谱进行对比以达到对钩藤种属关系的确认。