结直肠癌中CD133+细胞与血管生成及VEGF之间关系的研究

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目的:(1)研究94例结直肠癌组织标本中CD133、血管内皮生长因子的表达及其与临床病理特征之间的关系,探讨CD133表达与肿瘤微血管密度(MVD)、VEGF表达之间的相关性。(2)从结肠癌细胞系SW480中分离CD133+细胞并检测内皮细胞对CD133+细胞表达VEGF的影响。方法:(1)采用免疫组织化学SP两步法和组织芯片技术检测94例结直肠癌标本中CD133、VEGF、CD31的表达情况。(2)分别利用免疫磁珠分选技术和无血清悬浮培养法富集CD133+细胞。将SW480细胞或磁珠分选CD133+细胞分别在6种培养条件下进行培养,利用免疫组织化学法检测六组细胞在培养不同时间后CD133及VEGF的表达。结果:(1)结直肠癌中CD133的表达与肿瘤的分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。(2)结直肠癌组织中CD133的表达与VEGF表达及MVD呈负相关关系。(3)结直肠癌组织中微血管密度按CD133-/VEGF-,+→CD133+/VEGF-,+→CD133+/VEGF++,+++→CD133-/VEGF++,+++的顺序逐渐增加。(4)在含血清培养基或无血清培养基中,与内皮细胞共培养的SW480细胞CD133+细胞比率与不添加内皮细胞者比有所增加(P<0.05)。(5)在无血清培养基中,SW480细胞和CD133+细胞添加内皮细胞诱导后CD133+细胞表达VEGF的比率显著增加(P<0.01)(6)在培养不同时间后,六组不同培养条件下的细胞中CD133阳性细胞比率和VEGF阳性细胞比率之间呈负相关关系。结论:(1)结肠癌中内皮细胞可能促进结肠癌干细胞的自我更新。(2)内皮细胞可能通过诱导结肠癌干细胞表达VEGF来促进血管的发生。(3)CD133+细胞可能是通过自分泌或旁分泌VEGF的方式促进血管新生,微血管密度增加则促进CD133+细胞的分化成熟。
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