雌激素浓度对于髁突软骨细胞中雌激素受体mRNA表达的影响

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panxi1210
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:颞下颌关节髁突特发性吸收(ICR)是一种多发于青春期女性的髁突渐进性、不明原因的吸收伴前牙开颌、下颌后缩所致的严重的面部畸形。现有的研究发现ICR的患者均出现雌激素水平降低,但同样是雌激素水平低下的骨质疏松症却是全身性骨骼疾病,而ICR只发生在髁突。也就是说,迄今学术界尚无法解释ICR的患者不出现像骨质疏松症一样的全身性骨骼疾病,而只在髁突发生特异性吸收这一现象。研究已证实人的颞下颌关节中存在雌激素受体,即髁突软骨是雌激素的靶器官之一。推论:只发生在髁突吸收的这种特异性现象可能与髁突软骨中存在雌激素受体有某种潜在的关联。基于此,本研究拟以雌激素受体为切入点,试图通过半定量研究雌激素浓度对于髁突软骨细胞中雌激素受体mRNA表达的影响,揭示雌激素及其受体对髁突特发性吸收发病的影响,从而对颞颌关节髁突特发性吸收的发病机制做出科学的解释。  方法:实验材料取自3周龄的SD大鼠,脱颈处死后,在无菌条件下收集髁突软骨,用胰酶和II型胶原酶联合消化后分离培养髁突软骨细胞。将获得的的髁突软骨细胞分成两部分,一部分进行细胞鉴定及培养传代,另一部进行雌激素干预实验。细胞鉴定与传代:用甲苯胺蓝染色法,结合形态学鉴定髁突软骨细胞,并进行原代细胞传代,观察细胞形态和增殖速度的变化。  雌激素干预实验:细胞分为空白对照组、17-β雌二醇组(10-3,10一6,10-9,lO-12mmol/L)。其中对照组仅加入同浓度的雌激素溶剂乙醇。用倒置显微镜观察细胞的形态变化,在细胞接近长满时给药,加药24小时后收集各组细胞进行RT-PCR,计算出每组细胞中GAPDH及ERα mRNA和ERβ mRNA的CT值,进行统计分析,所有数据以均数士标准差表示,采用单因素方差分析,组间比较采用LSD法,量效关系用结果:刚接种的髁突软骨细胞呈球形,约12h后可见细胞贴壁,培养箱静置24h后可见大部分细胞贴壁,起初为圆形,后逐渐增大成多角形,有较多突起,胞核淡染。3-4天后,可见细胞呈集落状生长,一周左右细胞逐渐融合成单层,呈“铺路石“样生长。收集的原代细胞经甲苯胺蓝染色后见胞浆蓝染,细胞外可见异染颗粒。雌激素干预实验发现无论是实验组还是空白对照组中,ERα和ERβ在体外培养的髁突软骨细胞中均有表达,外源性的17β雌二醇能够上调ERα的基因表达同时下调ERβmRNA表达。其中10-9mmol/L作用下,ERαmRNA上调最为明显。  结论:1.体外培养的大鼠髁突软骨细胞传代至第三代后开始去分化。  2.大鼠髁突软骨细胞存在ERα和ERβ。  3.E2可以上调ERα的表达而下调ERβ的表达,在生理范围的雌激素浓度下,E2上调ERα基因表达的作用最为明显。
其他文献
培训效果的评估历来都是困扰企业培训管理者的难题,本文旨在通过模型的创新和评估体系建设的实践使企业培训效果的评估工作更具落地性和实效性.以培训效能为切入点,将其分为
为将思想政治教育贯穿于民办高校专业课堂,郑州西亚斯学院建筑学院将建筑学专业作为教学研究对象,通过对专业课程思政的概念与内涵解读、郑州民办高校思政教育现状问题的分析
在现代经济发展中,电力供应和维护成为提高社会进步动力的关键因素之一.电力供应中必然涉及带电作业,而如何更好地预防和控制带电作业危险点,成为维护社会正常运行秩序和保障
智能电网作为节能减排的重要方式之一,可以有效提升电力企业的工作效率,推进企业的发展.现阶段,我国信息技术在迅猛发展,这也使得智能电网逐步成为电力行业发展的新标杆.不同
近些年,我国正快速发展社会经济,同时加快了城市化进程,对电力能源也提出更多的需求.为此,电力供应系统迎来新的挑战,尤其是配网调度上.过往的调度方式,早已不能满足新形势的
作为一门逻辑性思维较强的学科,数学课程对学生的数学思维的培养具有非常重要的意义与作用。思维的培养要从养成学生思考能力开始,在日常的教学过程中,教师应该有效运用提问的方
随着居民经济水平的不断提高,电力在日常生活扮演的角色越来越重要,对电力的需求不断提升.对配电网的规划成为城镇规划中的重要组成部分,其在某种意义上保证电力传输的可靠性
我厂是全国最早投产的氧气顶吹转炉炼钢厂。原设计能力年产钢60万吨。改革以来,产量大幅度提高,1987年达222万吨,是设计能力的3.7倍,也就是说现在一个炼钢厂相当于四个炼钢
某单位在制订区域中期经济发展战略时,有人提议先交给本单位的干部群众讨论一下,征求意见,改进完善后再上报上级机关审查批准。然而,单位负责同志却手一挥,不以为然地说:“
2008年,中国经历了年初的雨雪冰冻灾害和5月份的汶川大地震,随后又经历了奥运会、残奥会、“神七”载人航天飞行、纪念改革开放30周年等重大事件,特别是汶川大地震和奥运会,