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目的:miRNA是一类小的非编码RNA,通过与靶标基因mRNA的3’UTR区部分碱基配对使得靶标基因翻译抑制或降解,从而起到调控靶标基因的作用。miR-155可调控巨噬细胞增殖,炎症反应,脂质代谢等过程,在动脉粥样硬化过程中起关键调控作用。本实验通过骨髓移植的方法构建造血miR-155缺陷的LDLR-/-小鼠,研究miR-155缺陷对LDLR-/-小鼠动脉粥样硬化产生的影响及相关机制。方法:动物实验中,将24只LDLR-/-雌性小鼠随机分成两组,致死剂量辐射后,LDLR-/-雌性小鼠接受WT(C57BL/6)或miR-155-/-小鼠的骨髓细胞,4周开始给予高脂饮食加速动脉粥样硬化进展,12周后接受安乐死。胸腹段主动脉4%多聚甲醛固定过夜后,剥离结缔组织,剖开固定后,油红染色,ImageJ计算斑块面积,比较小鼠主动脉剖面AS斑块面积;心脏及主动脉根部用OCT包埋,在主动脉根部作10μm系列冰冻切片,油红染色,Image J计算斑块面积,比较两组间主动脉根部AS斑块面积;主动脉根部冰冻切片进行免疫组化染色,分析斑块中巨噬细胞比例;TUNEL染色分析凋亡细胞比例;HE染色分析主动脉根部的坏死中心面积。细胞实验中,将miR-155 inhibitor以脂质体法转染LDLR-/-雌性小鼠原代腹腔巨噬细胞,转染72h后,加终浓度为1OOng/ml的LPS分别处理12h后RIPA裂解细胞提蛋白,处理3h后Trizol收细胞提总RNA。Western Blotting检测相关蛋白水平;实时荧光定量PCR检测miR-155相关的一些lnc RNAs,miR-155靶标基因以及一些炎症因子的表达水平。结果:动物实验中,通过骨髓移植的方法成功构建骨髓细胞miR-155-/-的LDLR-/1雌性小鼠模型。骨髓移植4周后开始高脂饮食,高脂12周后接受安乐死,两组小鼠的体重、脾重均无显著差异。接受骨髓移植后的LDLR-/-雌性小鼠的腹腔巨噬细胞和脾脏细胞均不表达miR-155。胸腹段主动脉油红染色,比较发现骨髓细胞miR-155-/-的小鼠主动脉剖面AS斑块面积明显增加(p<0.05),尤其在主动脉弓部(p<0.01);主动脉根部冰冻切片油红染色,显示骨髓细胞miR-155-/-的小鼠主动脉根部AS斑块面积明显升高(p<0.05);骨髓细胞miR-155-/-的小鼠主动脉根部冰冻切片分析斑块处细胞组成,免疫组化染色显示巨噬细胞比例增加(p<0.05),TUNEL染色显示凋亡细胞比例增加(p<0.05),HE染色显示主动脉根部的坏死中心面积增加(p<0.05)。LDLR-/-小鼠腹腔巨噬细胞转染miR-155 inhibitor和NC,LPS处理后lncRNA MIR155HG表达明显升高,但是与NC组相比,转染miR-155 inhibitor可减弱lncRNA MIR155HG的升高趋势。WT和LDLR-/-小鼠腹腔巨噬细胞中miR-155 一些相关的lncRNAs(MIR155HG,lncRNAH19)、靶标基因(Jarid2)以及炎症因子(IL-6,IL-1β,TNF-α)等的表达存在差异。结论:成功构建骨髓细胞miR-155-/-的LDLR-/-小鼠模型。LDLR-/-小鼠中miR-155缺陷导致动脉粥样硬化斑块面积增加,斑块处巨噬细胞比例增加,凋亡细胞比例增加。LDLR-/-小鼠模型中,miR-155可能通过影响lncRNAMIR155HG的表达,影响动脉粥样硬化进程。不同基因型小鼠中miR-155可能靶向不同的lncRNAs和靶标基因,从而使miR-155在不同基因型小鼠中产生不同的效应,影响AS的发生发展。