神经退行性疾病，严重威胁人类的健康和寿命。睫状神经营养因子(CNTF)能促进多种神经元的存活，外源性CNTF能有效地改善受损神经的功能，因此CNTF用于治疗神经损伤和神经退行性疾病。此外，CNTF处理的病人出现脂肪储存减少，体重明显下降。CNTF具有类似于Leptin作用，调节下丘脑饮食中心抑制饮食，引起脂肪动员，下调体重。对饮食诱导的肥胖小鼠模型，CNTF下调体重作用比Leptin更加明显。研究CNTF下调体重的机制可为减肥药物的研制开拓思路。 本研究克隆了人CNTF基因，实现了在大肠杆菌中高效表达重组CNTF。目标蛋白以包涵体的形式存在，表达量占全菌总蛋白的35％以上，经变性、复性纯化获得纯度大于90％的目标蛋白。蛋白分子量大约为22.9kD，等电点测定为pH6.6。 分离10天龄的鸡胚背根神经节，经0.125％胰酶消化后，纯化神经元细胞，用于检测重组的人CNTF(rhCNTF)对神经元的影响。接种1000个神经元细胞到预先用多聚鸟氨酸—层粘蛋白包被的96孔细胞培养板上，加入用培养液(10％胎牛血清的DMEM)稀释的CNTF样品，以培养液为阴性对照组，大鼠CNTF为阳性对照组，37℃，5％CO2培养24h，计算存活的神经元细胞数。活性蛋白的获得为进一步研究其生理学作用机制奠定了基础。 因实验室工作需要，在完成上述工作的同时，我们还研究人骨形态发生蛋白-4(Humanbonemorphogeneticprotein-4，hBMP-4)cDNA基因的克隆和表达。我们提取了人肺组织的总RNA，利用RT-PCR方法获得hBMP-4cDNA基因，将该基因克隆于真核表达载体pcDNA3.1(-)中。转染CHO细胞，筛选稳定克隆，WesternBlot初步证明培液中存在BMP-4，但表达水平很低，我们正努力提高其表达水平。