大蒜素及蒲公英提取物对粪肠球菌的抑制作用

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目的:牙髓病、根尖周病主要是以兼性厌氧菌和厌氧菌为主的混合细菌感染。生存能力顽强的一些细菌能够残留在经过完善的根管治疗,机械及化学预备,以及药物消毒后的根管内及根尖区。粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)便是在失败的根管治疗中检出率较高的一类细菌,在根管持续感染和再感染中起着重要的作用,它们的存在造成感染的持续存在。粪肠球菌在牙根管内无论是以自身单一菌种,还是和其他细菌联合的方式,均可以引发感染,并能够抵抗传统治疗手段中的机械化学预备、药物冲洗、药物消毒等作用,耐受根管充填后的根管系统内严苛的生存环境,长期定植于根管内。大蒜素是从百合科葱属植物大蒜的鳞茎中提取的一种有机硫化物,其有效成分为二烯丙基硫代亚磺酸酯(C6H10O2S2),其灭菌谱广,能抑制或杀灭多种球菌、杆菌、真菌、病毒,并能增强机体的细胞免疫功能,且有报道大蒜素可以裂解内毒素类物质。临床上目前主要将其抗菌消炎作用应用于饲料、食品和医药。蒲公英别名婆婆丁、黄花地丁、奶汁草等。其药味苦、甘,性寒、无毒,入肝、胃经。中医指出其具有清热解毒、消肿散结、止痛散瘀、利尿通淋等功效。蒲公英同属植物中含有多种生物活性成分,尤其富含酚酸类化合物,如咖啡酸和绿原酸,这些即为蒲公英提取物的主要有效成分。大蒜素和蒲公英都有很好的抑菌作用,更重要的是其作为一种中药具有组织相容性好、毒副作用小的优点。且已有研究证实其可以有效的抑制感染根管内的细菌,尤其是对厌氧菌有更好的抑杀作用。本实验将大蒜素注射液、蒲公英提取物溶液作为试验药物,以临床效果明确的两种药物甲醛甲酚合剂(FC)、氢氧化钙制剂作为对照药物,通过观察对比这些药物抑制感染粪肠球菌的人离体牙根管的能力,从而初步评价这两种中药杀灭粪肠球菌的效果,为牙髓病和根尖周病的临床用药提供有效参考。  方法:选取正畸拔除的人单根管牙60颗,清除表面污垢,并用超声波除去牙石,将其随机分成2个实验组(大蒜素组和蒲公英提取物组)和4个对照组(阴性对照组、阳性对照组、甲醛甲酚组、氢氧化钙糊剂),每组10颗牙。用5.25%NaClO溶液浸泡标本牙齿24小时后,用逐步后退法预备根管至40号,预备时采用17%EDTA溶液与5.25%NaClO溶液交替冲洗,预备完成后应用超声根管震荡冲洗。使用高速金刚砂车针磨除牙齿的冠方及根尖区,保留根中圆柱形牙根,长度均长为6mm。将制备好形态的所有牙根浸入牛脑心浸液(BHI)试管中,高温高压蒸汽灭菌后置于37℃环境下5%CO2培养箱内培养24小时,通过观察肉汤浑浊度确定灭菌效果。制备粪肠球菌标准菌液并用50颗牙建立根管感染模型,并将大蒜素、蒲公英提取物、FC、氢氧化钙糊剂和生理盐水分组置于感染根管模型内,37℃环境下5%CO2培养箱内培养,分别于实验第3天和第7天时,各组分别取5颗标本牙根,磨取4mg内层牙本质粉末,置于含有2mlBHI肉汤中,继续37℃环境下5%CO2培养箱内培养72h后取试管内上层液体,用比浊仪读取浊度。同时将各组取上层液体接种于血琼脂培养基上,37℃环境下5%CO2培养箱内培养48h,快速革兰氏染色,以确定细菌种类。  结果:  1第3天时,大蒜素组、FC组、阴性对照组牙本质小管中残留细菌量无差别(P>0.05);蒲公英提取物组、氢氧化钙糊剂组牙本质小管中残留菌量与阴性对照组有差别(P<0.05);  2第7天时,各组实验药物与阴性对照组牙本质小管中残留菌量均无差别(P>0.05)。  结论:  1大蒜素在第3天时已能杀灭粪肠球菌。  2蒲公英提取物在第7天时可以杀灭粪肠球菌。
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