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捕食线虫模式真菌少孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora)可以产生一类特有的参与调控其真菌形态的杂合生源信号小分子化合物----少孢素类化合物(Arthros porols),该类化合物结构包含一个六元环的倍半萜骨架和一个环己醇类片段,其生物合成可能涉及到萜类合成酶(Terpene synthases, TPS)和聚酮类合成酶(Polyketide synthase, PKS)的共同参与。通过生物信息学分析,在A. oligospora基因组中有7个可能的TPS基因,其中,仅有两个倍半萜合成酶基因AOL_s00078g383和AOL_s00083g86。本文以这两个倍半萜类合成酶基因以及1个萜类合成酶基因AOL_s00054g768作为研究目标,通过分子生物学原理和方法分别获得了这3个TPS基因的敲除菌株。应用HPLC检测方法,对3株敲除菌株的发酵液粗提物进行了少孢素类化合物的化学检测分析,在三株突变株中均检测到少孢素类化合物,表明这3个TPS基因可能都不直接参与Arthrosporols的生物合成。但在突变株ΔAOL_s00083g86,发现Arthrosporol A的含量增加。进一步的GC-MS分析,突变株AAOL_s00083g86缺失化合物2-Hydroxy-2,4,4-trimethyl-3-(3-methylbuta-1,3-dienyl) cycl-ohexanone,突变株AAOL_s00078g383缺失化合物7-Oxabicyclo[4.1.0]heptane,2,2,6-trimethyl-l-(3-methyl-1,3-butadienyl)-5-methylene,这2个化合物与PKS/TPS杂合生源的少孢素类化合物中的倍半萜部分具有相同骨架结构,表明基因AOL_s00078g383和AOL_s00083g86可能参与六元单环类型倍半萜的生物合成,但并不参与PKS/TPS杂合生源的少孢素类化合物中的倍半萜部分的生物合成。三株突变株在平板菌丝生长、孢子形态,孢子萌发率,捕器形成和线虫捕食率等方面与野生菌株比较,发现突变株MOL_s00083g86目比野生型菌株平板菌丝生长速率较快；突变株AAOL_s00083g86,△AOL_s00054g768在产孢能力上增加了近一倍。本文还开展了对参与A. oligospora中Ku70基因进行了敲除工作。Ku70是参与真核生物DNA双链断裂修复的重要基因,Ku70功能的缺失能导致重组效率提高,进而可以提高以同源重组为方式的基因打靶效率。因此本文通过分子生物学手段初步构建并获得了A. oligospora的Ku70缺失菌株,为更好构建A. oligosporaKu70工程菌株奠定基础。