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表柔红霉素是重要的抗肿瘤药物,同时也是工业生产表阿霉素的重要前体。以表柔红霉素基因工程菌SIPI-A0707发酵方法生产表柔红霉素可以省去多步的化学合成反应,降低成本,减少污染,创造很大的经济效益和社会效益。本文对表柔红霉素的发酵工艺和分离纯化工艺进行了系统的探索。本实验室首先将表柔红霉素产生菌基因工程菌SIPI-A0707进行自然分离,得到一株传代稳定的高产菌株N25,并将其作为出发菌株进行选育。首先考察了紫外诱变的最佳剂量,并在此剂量下进行两次连续诱变,对每次诱变获得的高产菌株进行传代稳定性考察,最终得到一株产量比出发菌株提高21%,传代稳定的突变株UV21。然后将紫外诱变得到的高产菌株UV21进行产物耐受性筛选,首先考察了柔红霉素添加到高氏培养基的最佳剂量,并在此剂量下进行筛选,对每次诱变获得的高产菌株进行传代稳定性考察,最终得到一株产量比出发菌株提高了44%,传代稳定的突变株SIPI-A0708。将突变株SIPI-A0708进行摇瓶培养,考察发酵培养基的碳源、氮源和无机盐对发酵及产抗水平的影响,得到一组较适宜的发酵培养基配方;并在此培养基配方下,对其培养条件进行考察,初步确立了较合适的培养条件。培养基及培养条件优化后,突变株的发酵水平比未优化前提高了96%。以摇瓶培养基优化后的配方和条件为基础,放大至15L发酵罐进行发酵,单位提高了129%。优化了从发酵液中分离纯化表柔红霉素的工艺路线:首先对发酵液中的目的产物进行粗提;然后通过吸附洗脱实验优选出合适的大孔阳离子交换树脂,并对该树脂的层析参数进行考察,富集目的产物和除去部分杂质,再通过吸附洗脱实验优选出合适的大孔吸附树脂,并对该树脂的层析参数进行考察,建立合适的吸附洗脱条件,最后冷冻干燥制得成品,该成品的HPLC纯度为98.1%,整个分离工艺总收率在40%以上。