丹酚酸A、C配伍对HSA诱导HK-2细胞炎症因子及氧化应激反应的影响

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目的:研究丹酚酸A、C配伍对人血清白蛋白诱导肾小管上皮细胞过程中炎症因子及氧化应激反应的影响。方法:人肾小管上皮细胞于体外培养,随机分成5个组:正常组、人血清白蛋白组(即模型组)、药物治疗组包括丹酚酸A组、丹酚酸C组、丹酚酸A+C组(丹酚酸A和C组分按1:1加入)。无血清培养液同步化24小时后,除正常组外,其余组分别加入HSA干预24h、48h、72h,各治疗组同时加入药物治疗。ELISA检测MCP-1、CCL7、IP-10表达情况。细胞免疫荧光技术定位检测MCP-1、IP-10。Western Blot检测M-CSF。应用水溶性四唑盐法(WST-1法)检测细胞SOD活力,应用二法硫双硝基苯甲酸法(DTNB法)检测细胞GSH含量,应用硫代巴比妥酸法(TBA法)测定细胞MDA含量。结果:1.MCP-1、CCL7、IP-10的检测结果1)ELISA检测结果与相对应时间点模型组比较,24h、48h、72h三个时间点各给药组MCP-1、CCL7、IP-10的相对表达量减少(P<0.01)。各给药组之间相对应时间点比较,24h、48h、72h三个时间点丹酚酸A+C组MCP-1、CCL7、IP-10的相对表达量均较丹酚酸A组、丹酚酸C组MCP-1相对表达量降低(P<0.01)。2)MCP-1和IP-10阳性表达为绿色荧光,表达部位主要位于人肾小管上皮细胞的胞质。2.M-CSF检测结果与相对应时间点模型组比较,24h、48h两个时间点各给药组M-CSF相对表达量减少(P<0.05),72h时间点丹酚酸C组和A+C组M-CSF相对表达量较模型组减少(P<0.05)。24h、48h、72h三个时间点丹酚酸A+C组M-CSF的相对表达量均较丹酚酸A组、丹酚酸C组降低(P<0.05)。3.SOD、GSH、MDA检测结果与相对应时间点正常组比较,24h、48h、72h三个时间点模型组细胞SOD活力和GSH含量相对降低(P<0.05)。与相对应时间点模型组比较,24h、48h、72h三个时间点各给药组SOD活力和GSH含量增高(P<0.05)。各给药组之间相对应时间点比较,24h、48h、72h三个时间点丹酚酸A+C组SOD活力和GSH含量均较丹酚酸A组、丹酚酸C组增高(P<0.05)。与相对应时间点模型组比较,24h、48h、72h三个时间点各给药组MDA的含量减少(P<0.05)。各给药组之间相对应时间点比较,24h、48h、72h三个时间点丹酚酸A+C组MDA的含量低于丹酚酸A组和丹酚酸C组(P<0.05)。结论:丹酚酸A、C配伍对人血清白蛋白诱导的人肾小管上皮细胞MCP-1、CCL7、IP-10的表达有抑制作用。可在一定程度上提高SOD的活力和增加GSH的表达,减少MDA的表达。推测丹酚酸A、C配伍可能通过减少炎症反应,增强抗氧化作用来改善肾纤维化的进程。
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