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在本研究中,我们一共采集并鉴定了 45种药用植物,利用系统溶剂萃取法得到每种植物的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、萃取剩余部分和水提取物共6部分,将每部分提取物溶解于DMSO溶液,配制成浓度为100mg/ml的筛选母液,成功构建了一个由270个组分构成的药用植物提取物库。首先采用MTT法对该提取物库进行针对人乳腺癌细胞MCF-7、人肝癌细胞Huh-7、人宫颈癌细胞HeLa和人急性淋巴白血病细胞BALL-1的增殖抑制活性筛选,同时用人乳腺上皮细胞MCF-10A评价各提取物对正常细胞的毒性,结果获得多个具有普遍抗癌活性的组分。选取艾蒿石油醚提取物(IC50=16.43μg/ml)、八角金盘石油醚提取物(IC50=29.34μg/ml)、海桐石油醚提取物(IC50=24.42μg/ml)、三角梅石油醚提取物(IC50=26.25μg/ml)、空心莲子草石油醚提取物(IC50=19.19μg/ml)和小飞蓬氯仿提取物(IC50=14.32μg/ml)这6种对MCF-7细胞IC50值低于30μg/ml的组分,对其分别作用MCF-7细胞24h、48h和72h后的剂量效应进行评价。选择艾蒿石油醚提取物进行针对MCF-7细胞的活性跟踪分离,一共获得14个分离组分,其中编号为6号的组分对MCF-7细胞具有最强的增殖抑制活性,该组分在10μg/ml的浓度下对MCF-7细胞的增殖抑制率为43.11%。选择空心莲子草石油醚提取物和小飞蓬氯仿提取物通过一系列生物学实验对其作用于MCF-7细胞的机理进行初步研究。这些实验包括光学显微镜下观察细胞形态,Hoechst33342染色实验观察细胞核形态变化,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力和AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果如下:(1)加入空心莲子草石油醚提取物和小飞蓬氯仿提取物处理后在光学显微镜下观察发现MCF-7细胞均出现了变圆皱缩的现象且随着提取物浓度增加,该现象更加明显。(2)细胞核染色结果显示加入空心莲子草石油醚提取物和小飞蓬氯仿提取物处理后MCF-7细胞核均出现不同程度的损伤,细胞核形态均发生异常变化。(3)平板克隆实验结果显示空心莲子草石油醚提取物和小飞蓬氯仿提取物均具有抑制MCF-7细胞克隆形成的能力,而且呈现出明显的浓度依赖性。(4)AnnexinV-FITC/PI双染法结果显示空心莲子草石油醚提取物能够诱导MCF-7细胞发生早期凋亡,小飞蓬氯仿提取物能够促进MCF-7细胞发生坏死。