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目的:结直肠癌(CRC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在消化道肿瘤发病率位居第三,部分地区已上升至第二位。随着我国人民生活水平的提高,饮食结构的改变,近年来我国的CRC每年发病增速已为世界平均数的两倍。虽然手术前后的放化疗等治疗方法已对CRC的治疗产生了积极的效果,但中晚期CRC的5年的生存率仍然不算乐观。日益严峻的诊治任务需要医务工作者能在CRC早期就能够明确诊断和治疗。所以为了应对CRC的延误诊治我们需要一个行之有效的早期筛查方法,以便于早期使得CRC得到根治效果。目前对于CRC的诊查方法包括结直肠镜及粪便隐血实验等手段,但是都不能同时具备依从性好,无创,敏感及特异性高等特点,这样就使得我们的早期诊断工作难以进行。有数据显示只有大概10%-15%的CRC患者得到了早期诊治。为了以提高五年甚至十年生存率,我们急需寻找一种具备无创,方便灵敏早期诊断的新方法。在粪便中检测与肿瘤相关DNA的改变为早期诊断CRC提供了新思路。作为对肿瘤发生机制的重要补充,表观遗传学改变是较遗传学改变更为常见的基因表达调控机制。对于检测粪便中基因启动子甲基化相较于检测基因突变效果更为理想。WIF-1基因编码的WIF-1蛋白属于分泌型蛋白,没有半胱氨酸富集区是它与分泌型卷曲蛋白相关家族( secreted frizzled - related protein family, sFRP)的区别。WIF-1蛋白与Wnt蛋白有很强的亲和力[1],从而能竞争性的阻断Wnt信号的传导。WIF-1转录失活与其启动子过度甲基化频率增高密切相关,并且与Wnt通路的异常导致的CRC关系密切。我们推测WIF-1启动子区的甲基化检测可作为粪便DNA筛查的标志,遂检测结直肠癌及结直肠良性病变的病人的粪便中WIF-1的启动子的甲基化情况并结合临床病理资料进行分析,评价其对癌及癌前病变早期诊断的作用并同时总结从粪便提取DNA到最后进行PCR的结果及经验。方法:1收集河北医科大学第四医院2009年5月至2009年12月在外二科住院的结直肠癌病人以及在内镜室检查肠道息肉病人和正常人的粪便标本,共62例,记录最终病理结果2使用粪便细胞DNA提取试剂盒提取粪便DNA确定符合标准的DNA后记录资料并在验证人基因组DNA存在后使用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测粪便DNA中WIF-1基因启动子甲基化情况。3运用统计软件SPSS13.0对数据进行统计学分析。结果:共提取粪便DNA62例,最终验证人基因组存在并完成MS-PCR实验例数49例其中结直肠癌(CRC)组27例,结直肠息肉组14例和正常对照组8例,CRC组和结直肠息肉组中粪便DNA中WIF-1基因启动子甲基化情况分别为70.4%(19/27)和50%(7/14)而正常对照组中无甲基化出现,检测粪便中WIF-1基因甲基化诊断结直肠癌的敏感性为70.4%,特异性为68.2%诊断癌及进展期腺瘤(包括高度不典型增生、绒毛状腺瘤或> 1 cm的管状腺瘤)的敏感性分别为68.8%和特异性76.5%。CRC组与正常对照组两者间甲基化情况做统计学分析比较P=0.001(P<0.05)和结直肠息肉组与正常对照组间甲基化情况比较P=0.022(P<0.05)差异均有统计学意义CRC组和结直肠息肉组做甲基化情况差异的统计学分析P=0.306(P>0.05)两组间甲基化差异无统计学意义。CRC组中WIF-1甲基化情况和临床资料间(性别,年龄,肿瘤位置,组织分化程度,淋巴结是否转移以及TNM分期)做统计学分析,均无统计学意义。结论:运用商品化的试剂盒提取粪便中的DNA成功率较高,但取材细节和标本本身对提出DNA的量仍能产生有较大影响。DNA提出,亚硫酸盐处理后并进行MS-PCR效果较好,说明试剂盒对去除粪便中抑制物能力较高。检测粪便DNA中WIF-1基因启动子甲基化用于结直肠癌及癌前病变的诊断可以获得较高的敏感性,可作为早期诊断的指标,但在区分癌与腺瘤方面,缺乏良好的特异性。WIF-1基因启动子甲基化情况与结直肠癌各临床病理特征间无关(包括性别,年龄,肿瘤位置,组织分化程度,淋巴结是否转移以及TNM分期)。检测粪便DNA中WIF-1基因启动子甲基化情况渴望成为未来结直肠癌早期无创诊断指标之一。