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近年来,甘肃省苹果种植面积不断扩大,苹果产业已经成为该省苹果主要种植区经济发展主要途径,然而苹果病毒病的发生给苹果产业造成严重危害。为明确甘肃省苹果病毒病的种类、发生与分布情况,本研究通过田间调查对甘肃省苹果花叶病毒和苹果锈果病毒两种主要的非潜隐性病毒的发病率、症状类型进行了调查,通过DS-ELISA检测法、汁液摩擦接种法对甘肃省苹果花叶病毒的带毒情况和寄主范围进行了测定,通过电子显微镜技术对受苹果花叶病毒侵染的寄主组织病变情况进行了观察,通过RT-PCR技术对苹果锈果病毒、苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒、苹果茎痘病毒进行了检测。为甘肃省苹果病毒病的发生情况和防治奠定基础。现将研究结果总结如下:1.2013年对甘肃省静宁县、庄浪县、兰州市苹果种植地区苹果花叶病毒病进行调查,结果表明:3个地区平均发病率为19%,其中兰州市平均发病率为11.7%,静宁县平均发病率为24.6%,庄浪县平均发病率为25.2%,10年以上树龄植株发病严重,富士较新红星发病严重;通过田间症状类型观察,将苹果花叶病毒侵染叶片的症状类型分为8种类型,分别为条斑型、斑驳型Ⅰ、斑驳型Ⅱ、环斑型、花叶型、镶边型、云斑型、网斑型。2013年9月对兰州市苹果种植区苹果锈果病进行了调查,结果表明:兰州市苹果锈果病普遍发生,平均发病率为6.3%,田间症状主要为锈果型、花脸型、锈果花脸混合型,根据病斑面积将花脸型分为三个等级。2.从甘肃省静宁县、庄浪县、兰州市采集有花叶症状和无症状苹果叶片84份,采用DS-ELISA法对苹果花叶病毒病进行检测,结果表明总带毒率为78.57%,三个地区的平均带毒率分别为84.38%、81.25%和65%,有花叶症状样品带毒率分别达到了100%、87.5%、80%,无花叶症状的样品带毒率分别为68.75%、75%和50%。共选择9个科19种寄主植物进行寄主范围测定,结果表明,菜豆、龙葵和芹菜无明显症状,其他寄主植物表现花叶、枯斑、褪绿斑、皱缩等症状。DS-ELISA检测寄主受侵染情况发现,普通烟、菜豆、龙葵、向日葵和芹菜表现阴性,其他14种寄主植物表现苹果花叶病毒阳性,普通烟和向日葵有明显症状,但DS-ELISA检测结果为阴性。3.选取有花叶病毒叶片和正常叶片组织进行超薄电镜切片观察,发现苹果叶片感染病毒后细胞发生着明显变化,发现病毒粒体以分散的长线状形式聚集排列在细胞质中,叶绿体结构发生明显变化,叶绿体畸形,淀粉粒膨胀、增多,在叶绿体内发现有铁蛋白存在,且叶绿体数目减少,远离细胞壁。4.应用RT-PCR技术对其他几种苹果病毒进行了检测,选取了夏季嫩枝和冬芽对植物组织总RNA进行了提取,嫩枝的RNA18S、28S条带清晰,5S较淡,OD230/260、OD230/260在1.9左右,所提的RNA完整性较好;而冬芽的总RNA18S、28S条带清晰,OD230/260和OD230/260都在1.8左右,可用于进一步的PCR扩增。共选取了8对引物进行了PCR扩增,引物XG2、TL2、JG2、 JD1分别对苹果锈果病毒、苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒、苹果茎痘病毒具有较好的检测效果,应用此体系对田间8份样品的检测结果发现,苹果锈果病的带毒率为25%,苹果褪绿叶斑病毒的带毒率为87.5%,苹果茎沟病毒的带毒率为62.5%,苹果茎痘病毒的带毒率为50%,苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒、苹果茎痘病毒3种病毒的复合侵染率达到了37.5%。