黄曲霉毒素是所有真菌毒素中对环境污染最严重，对人畜危害最大的一种毒素。这类毒素主要由黄曲霉、寄生曲霉产生，以污染玉米、花生、坚果等农作物及其制品为主。为了保护食品安全，科技工作者一直在寻求一种安全、经济、有效的方法来预防和降解黄曲霉毒素。通过筛选抗黄曲霉菌的有益微生物或利用该类微生物的活性物质进行消除或降低毒素的方法，正日益成为黄曲霉控制中的一条重要而有效的途径。根据黑曲霉良好的生理特性，本文采用黑曲霉为出发菌株，通过离子束注入筛选出高效生物防治黄曲霉毒素的菌株，经发酵分离出降解毒素的酶应用于被黄曲霉毒素污染的农产品的加工。 黑曲霉（Asperillus niger）是一类半知菌类，属于丝孢纲、丝孢目、曲霉属。广泛存在于各种气候带的土壤中。鉴于黑曲霉的产酶高、种类多，不仅适宜于大规模工业化生产，且生产的酶制剂安全、可靠、低毒等优良特点。目前研究的热点是通过生物技术方法有目的地改造从自然界分离筛选到的黑曲霉，以获得新型菌株，如用紫外线照射诱变、激光辐射、微波辐射、原生质融合和基因转化技术等来研制开发新型黑曲霉菌株。 本文采用 N+离子束注入生物体通过产生能量沉积、动量传递、质量沉积和电荷交换等四个方面的效应，并在 20kev 的能量下，以 30×2.6×1013 N+/cm2、50×2.6×1013 N+/cm2、70×2.6×1013 N+/cm2、90×2.6×1013 N+/cm2 等剂量的离子束分别注入黑曲霉，使黑曲霉遗传物质发生突变，然后从每种剂量的诱变株中筛选出一个菌落生长最大的和一个最小的诱变株，再分别进行扩大培养。根据同一突变株在不同培养基上生长状况不同，筛选出最佳培养基。其结果表明：第一 、不同剂量的离子束注入能够改变质膜上 Na+-K+ATP 酶活力，从而使菌体细胞对培养基中营养物质吸收和利用速率发生改变；通过外渗电导法的检测发现不同剂量的离子束注入能改变质膜的生物稳定性、对周围物质高度选择通透性和影响代谢状况。第二、不同剂量的离子束注入能改变苹果酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶的活力。其中苹果酸脱氢酶有来自细胞质和线粒体两种，前者影响细胞内生物合成；影响磷脂合成所需还原力和质膜的稳定性。线 iii<WP=7>粒体膜上琥珀酸脱氢酶活力的改变能影响能量的产生和三羧酸循环的速率；第三、观察到离子束注入能改变菌体内的苹果酸脱氢酶、多酚氧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、淀粉酶、酯酶、超氧化物歧化酶等酶活性和同工酶的活性，但不能诱导产生新的同工酶谱带；第四、离子束注入诱变后，能引起黑曲霉孢子的形态、结构发生变化。综上所述，通过各参数的分析比较，筛选出综合指标最好的突变株 90A，并用此突变株进行黄曲霉拮抗实验，发现此突变株与黄曲霉菌对峙培养中，镜检 90A 产生附着、缠绕、并列菌解等多种拮抗机制来抑制黄曲霉的生长。通过对产毒黄曲霉单独培养，突变株 90A 与产毒黄曲霉混合培养的研究，发现黑曲霉同时具有对产毒黄曲霉所产毒素有抑制合成或降解作用，而突变株 90A 更有效地阻止或降解产毒黄曲霉的产毒量；同时还发现 90A 黑曲霉本身不产生黄曲霉毒素。本文创新点：不同剂量的离子束注入引发黑曲霉生理生化指标改变及新基因重组菌株，初步阐明开发黑曲霉降解黄曲霉毒素的应用途径。