【摘 要】
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我国是世界人参主产区,人参产量约占世界总产量的70%。目前人参种植主要以农田栽参为主,土传病害是农田栽参亟待解决的主要问题之一。化学防治是目前主要的病害防治方法,但存在农药残留和环境污染等问题,生物防治由于其安全、环保、可持续等特点受到广泛关注。已报道芽孢杆菌、假单胞菌和木霉可以生物防治土传病害,其中,芽孢杆菌是研究最多的生防菌剂之一,在植物病害生物防治中被广泛地研究和应用。持续筛选具有生防潜力的
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我国是世界人参主产区,人参产量约占世界总产量的70%。目前人参种植主要以农田栽参为主,土传病害是农田栽参亟待解决的主要问题之一。化学防治是目前主要的病害防治方法,但存在农药残留和环境污染等问题,生物防治由于其安全、环保、可持续等特点受到广泛关注。已报道芽孢杆菌、假单胞菌和木霉可以生物防治土传病害,其中,芽孢杆菌是研究最多的生防菌剂之一,在植物病害生物防治中被广泛地研究和应用。持续筛选具有生防潜力的微生物菌株并深入解析其生防机制对促进人参可持续发展具有重要意义。贝莱斯芽孢杆菌是近年来的新兴微生物菌种,某些菌株在普通作物上已经显现出生防潜力,但在药用植物如人参中是否具有生防作用尚未可知。本研究以自主分离的贝莱斯芽孢杆菌为研究对象,设置不同接种处理进行盆栽试验,以明确贝莱斯芽孢杆菌对尖孢镰刀菌引起的人参根腐病的防治效果;随后对不同处理的人参及土壤的微生物组成进行了系统解析;在此基础上对菌株的抑菌机制进行了初步的探索。研究获得以下结果:(1)设置CK(不接菌)、F(尖孢镰刀菌)、S(贝莱斯芽孢杆菌YW17)、SF(YW17+尖孢镰刀菌)处理进行人参盆栽试验,结果表明在S和SF处理后的人参植株与CK同样健康,而F处理的人参植株叶片开始变黄枯萎。对收集后的人参株高和鲜重进行测定。F处理的人参植株与CK处理差异显著(P<0.05),地上地下部分无论是株高还是鲜重均有所减少。(2)通过高通量测序结果分析发现,芽孢杆菌属丰度在SF接种处理的植物地下部分显著高于其他处理,F处理的根际土壤和植物组织均检测到镰刀菌属,但地下组织要高于根际土壤和地上组织,SF处理地下组织镰刀菌属丰度显著高于根际土壤和地上组织,但相比于F处理有所下降。关联热图分析结果表明根部芽孢杆菌属与镰刀菌属丰度成负相关。LEf Se分析结果表明SF显著富集了对植物生长有益生作用的放线菌和真菌。(3)通过对贝莱斯芽孢杆菌YW17进行全基因组测序,发现YW17基因组存在一些与真菌细胞壁降解相关的水解酶,比如蛋白酶、几丁质酶和β-葡聚糖酶等。Antismash分析次级代谢产物合成基因簇发现,YW17有18个与次级代谢产物合成相关的基因簇,且大部分都具有抗菌活性。平板对扣法发现贝莱斯芽孢杆菌生长过程中产生的挥发性的物质对尖孢镰刀菌具有拮抗作用。通过硫酸铵沉淀法和盐酸沉淀法提取的粗提物表现出强抑菌活性,推测其可能是抑菌蛋白和脂肽。全基因组数据结合体外实验证明贝莱斯芽孢杆菌产生物膜及IAA能力较强,可能有助于其在根部的定殖。综上所述接种贝莱斯芽孢杆菌能帮助人参招募更多对人参有益的微生物共同抵御病原菌,且自身会分泌一些抑菌物质,从而抑制病原菌,以促进植物的健康生长。
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