前言 小肠缺血再灌注(intestinal ischemia reperfusion ⅡR)在临床多种情况下均可发生，是临床一系列疾病的病理基础；如肠系膜动脉栓塞、肠扭转、肠梗阻、失血性休克、严重多发创伤、腹主动脉瘤手术等，在病程及治疗中都会出现ⅡR；在小肠缺血过程中，可以导致细胞功能障碍，细胞及细胞间隙水肿，严重时导致细胞死亡；再灌注对缺血组织有以下两个有利方面：能量供应的纠正和毒性代谢产物的清除，因此再灌注是组织缺血损伤恢复的先决条件；然而，缺血组织再灌注也可导致局部更为严重的损害，并且可以导致远隔器官(肺、肝和肾等)的损伤。常可出现急性呼吸窘迫综合征、低血压和肝肾功能衰竭等并发症，文献报道死亡率为44％～89％。 ⅡR后的肺损伤往往首先出现，它是以非心源性肺水肿、微血管通透性增加及多形核白细胞(polymorphonuclear neutrophil PMN)积聚为特征；结果导致肺功能障碍，甚至呼吸衰竭，加剧小肠缺血损害，形成恶性循环，最终导致多器官功能障碍，危及病人生命。文献报道，在肺及其它器官里PMN的激活及其数量增加可能是导致MODS的一个重要环节。目前对ⅡR后肺损伤机制的研究倍受关注，可能涉及多种炎性和血管活性介质，包括氧自由基、PMN、内皮因子等；是目前研究的热点；至于ⅡR后肺损伤保护，国内外文献报道甚少，关于围手术麻醉期的肺保护更少有报道，因此有必要进一步深入研究。 异丙酚是一种新型静脉麻醉药，近些年由于其具有诱导及苏醒迅速安全可靠而广泛应用于临床麻醉和ICU病人镇静，随着对其研究的深入进行，对其作用的认识也逐渐加深；异丙酚与内源性抗氧化剂α-生育酚(VitE)和已知的抗氧化剂丁羟基甲苯(Butylated hydroxytoluene BHT)在化学结构上十分相似，因而也具备抗氧化作用，其作用包括降低组织氧耗、直接清除自由基、抑制脂质过氧化反应和调节细胞钙离子平衡等方面。异丙酚的抗氧化作用与VitE或BHT相似，直接与自由基反应，生成2，6-二异丙基苯氧集团，同时使自由基灭活；Musacchio等人在离体鼠肝线粒体、微粒体实验中结果显示异丙酚的抗氧化作用大于BHT。从现有的资料看，异丙酚抑制自由基介导的脂质过氧化作用可能是其主要的抗氧化机制。 在氧化应激反应中，自由基损伤和钙离子超载互为因果，互相协同;Eriksson等实验表明，异丙酚可通过捕获自由基，抑制氧自由基或过氧化脂质引起的离子通道蛋白的可逆性开放，防止线粒体内膜通透性升高、肿胀和溶血磷脂堆积;并且可直接作用于膜成分，从而抑制线粒体内膜通透性增加，稳定膜结构，进一步加强异丙酚的抗氧化作用。 目前，异丙酚的抗氧化作用研究主要集中于心肌和神经元细胞的保护方面;就其对llR后肺损伤的作用怎样，目前国内外均未见报道，我们预测异丙酚也应该具有保护作用。为此，我们设计了以下三部分实验内容，从形态学、生物化学及分子生物学方面探讨异丙酚对大鼠nR后肺损伤的影响及其作用机制，为围麻醉手术期间和术后肺损伤的防治及合理用药提供实验依据。实验材料 1.实验动物:SD雄性大白鼠120只，体重200一2509;由中国医科大学实验动物中心提供。 2.主要实验试剂及药品:异丙酚(PROPOFOL英国捷利康公司提供批号:咫巧3037);戊巴比妥钠(上海生化试剂三厂批号:84一06一12);1251标记白蛋白(北京东亚免疫研究所);血浆TNF一a试剂盒(北京东亚免疫研究所);TNF一a一抗及免疫组化试剂盒(武汉博士德公司);ICAM一1逆转录试剂盒PCR所需的酶和其他试剂均购自日本Takara公司;10%中性甲醛，2.5%戊二醛及其他试剂(国产分析纯)。 3.实验器材:小型动物呼吸机(HARvARD638CAT美国);RM一6000多导生理监测仪(日本光电);Detax气体监测仪(AGM一123一23一oo芬兰);A一ZooDS型电子天平(美国);原子吸收分光光度计(SPECTRAA 40P美国);01卿pus显微镜(日本);Olympus AX70显微摄像系统(日本);LKB一V型超薄切片机;透射电镜(OPTON EM10C，美国);JUNG一CM1800型切片机;高速低温离心机(D叩out ST一21型美国);KS一巧0超声波组织粉碎机(宁波科生仪器厂);GC一1200.9放射免疫计数器，(中佳光电仪器公司);HEIDOLpH DIAx 900型匀浆机(德国);PTC一100型PCR扩增仪(美国);KODAKID型凝胶呈像分析系统(美国);GIS一700D型数码凝胶扫描分析系统(上海);WFH一202型紫外透射仪(日本);可见光连续分光光谱仪(法国);DYY一111 3 IA型电泳仪(北京);MetaMo甲丫olympus Dplo/BX51型显微图像分析系统(日本);小动物手术器械等。实验方法 一、动物分组及模型制作 每一部分雄性SD大鼠40只，随机分为假手术对照组(I组)、小肠缺血再灌注组(11组)及分别给予异丙酚4mg·kg一‘·h一’、8 mg·kg一’·h一’、10 mg·kg一‘·h一‘(111、lV、V)5组。参照Koike等人方法制作大鼠小肠缺血再灌注模型。大鼠禁食12小时后，4%戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻醉;无菌条件下行气管切开、右颈动脉左颈静脉分别置管。气管切开插管后接小型动物呼吸机机械通气，用Detax气体监测仪监测ETc02，维持ETcq在4.67一5.60kP