肝癌是一种恶性程度很高的肿瘤，具有很强的致死性，早期诊断是有效治疗肝癌的关键。研究发现，GPC3蛋白是肝癌诊断的重要标志物，因此对GPC3蛋白进行标记对于我们更好的了解肝癌的发病机制，在众多的蛋白标记技术中，利用基因编码延伸的方法来对蛋白进行定点标记，通过这种方法具有对生物毒害低，对蛋白扰动作用小，并不影响蛋白的功能等优点。　　本文在文献调研的基础上，设计并合成了非天然氨基酸以及光点击化合物，通过基因编码延伸的方法对GPC3蛋白标记，从而实现对GPC3蛋白追踪，以及GPC3蛋白增加，释放进行观察，同时可以监测药物靶向到GPC3上的位点。　　第一章主要介绍了GPC3蛋白与肝癌之间的相互作用，并对这些年蛋白的标记方法进行了相应的综述，并提出了自己的课题。　　第二章构建了一系列的表达载体，包括吡咯赖氨酸tRNA合成酶表达载体，以及正向和反向筛选载体，同时构建吡咯赖氨酸的点饱和突变库。　　第三章设计并合成了非天然氨基酸降冰醇以及荧光染料，为后续对蛋白的标记提供了保证。　　第四章通过一系列的物理以及生物学实验，在大肠杆菌内实现了对GPC3蛋白的实时标记。　　第五章实验结论。