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目的:通过观察兔眼玻璃体切除联合非膨胀浓度全氟丙烷(C3F)填充术后早期晶体上皮细胞(LEC)超微结构改变及检测凋亡,探讨其与C3F8及并发性白内障的相关性。
方法:37只健康成年纯系新西兰白兔的74只眼,随机分为三组:正常组、对照组和实验组。A组为正常组7只兔(14只眼);B组为对照组30只眼,行单纯玻璃体切除BSS液填充术;C组为实验组30只眼,行玻璃体切除联合非膨胀浓度C3F8填充术。术后1、3、8、35、45天用Schiotz眼压计测量眼压,用裂隙灯显微镜定期观察晶体的混浊程度并照相。于术后1、3、8、35、45天分别取兔眼晶体制成光镜和电镜标本以观察晶。于术后第45天取兔眼晶体上皮细胞铺片,计算LEC凋亡率(TUNEL法)并检测Caspase-3的表达(免疫组化SABC法)。
结果:
1.眼压:对照组、实验组术后1、3、8、35、45天的眼压值与正常组两两比较差异无显著性(P>0.05)。
2.晶体混浊情况:
1)正常组、对照组和实验组术后晶体的总混浊率分别为0.00%、0.00%、93.33%。实验组术后1、3、8天晶体的混浊率与正常组和对照组比较差异均有显著性(p<0.0125)。
2)实验组晶体混浊的发生率及程度,随着C3F8与晶体接触面积的增加和CaF8残留时间的延长而增加,但会随着C3Fs的消失而减轻或消失。
3.晶体组织病理学改变:
1)光学显微镜:正常组与对照组术后第1、3、8、35、45天的LEC均无明显变化。实验组术后1、3、8天LEC仅出现细胞水肿表现:术后第35、45天LEC出现了变性,细胞重叠和坏死等不可逆性损害。
2)透射电子显微镜:正常组与对照组术后第1、3、8、35、45天的I.EC均无明显变化。实验组术后1、3、8天LEC仅出现细胞水肿表现,在术后第35天出现染色质高度盘旋,部分边集;术后第45天出现特征性凋亡小体。
4.LEC凋亡率(AI):术后45天正常组、对照组、实验组晶体上皮细胞的平均AI值分别是:0.19%、0.21%、15.10%。实验组在术后45天的LEC凋亡率与正常组和对照组差异有显著性(p<0.0125),正常组与对照组比较差异无显著性(p>0.0125)。
5.Caspase-3的表达:术后45天正常组、对照组、实验组LEC的平均Caspase-3阳性表达率分别是:0.61%、1.11%、45.23%。实验组在术后45天Caspase-3的阳性表达率与正常组和对照组比较差异有显著性(p<0.0125),正常组与对照组比较差异无显著性(p>0.0125)。
6.术后45天实验组:LEC的AI增多时,Caspase-3的阳性表达率也相应增加,二者呈显著正相关(rs=0.69,P<0.05)。
结论:
1.玻璃体切除联合C3F8填充术后早期引起的白内障多为一过性,其发生率及程度与C3F8和晶体接触的面积与时间呈正相关。
2.玻璃体切除联合C3F8填充术后早期形成的白内障虽为一过性性的,但可引起LEC发生永久性损害。
3.玻璃体切除联合C3F8填充术可引起LEC凋亡。
4.玻璃体切除联合C3F8填充术后LEC凋亡与Caspase-3表达增高有关。
5.玻璃体切除联合C3F8填充术后晶体组织结构损害(包括暂时性损害和永久性损害)和LEC凋亡的发生,可能是引起并发性白内障的主要原因之一。