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NO是内皮细胞释放的最重要的调节血管活性物质之一，由eNOS催化产生。一氧化氮系统功能降低是内皮细胞功能紊乱的重要机制之一。因此，恢复一氧化氮系统的正常功能是治疗心血管疾病的重要治疗策略，开发相关药物靶点为研制治疗心血管疾病的药物具有指导作用。 目的:1研究ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂埃他卡林及其衍生物激活KATP对eNOS磷酸化的影响。2研究胆碱能受体激动剂对M3受体沉默后细胞释放NO的影响。3激活非神经性乙酰胆碱受体对功能相关分子的影响。 方法:1在培养的内皮细胞上给予(1)10-9-10-5mol/L不同浓度的纳他卡林孵育5 min，(2)预孵育格列苯脲30min，给予1μmol/L纳他卡林刺激5 min，提取细胞总蛋白，用Western Blot法检测eNOS磷酸化位点S1177、S635、T495、S116及S615的变化。2在培养的EA.hy926细胞上，加入特异性M3受体siRNAs，36h后用免疫印迹法测定M3受体蛋白表达量;在M3受体沉默的细胞模型上，以NO释放量为观察指标，分别研究10μmol/L的乙酰胆碱、氧化震颤素和槟榔碱对细胞功能的影响。3在内皮细胞上分别孵育10μmol/L乙酰胆碱、氧化震颤素、毛果芸香碱和烟碱12h，用Western Blot法测定Destrin，FKBP1A，MIF和Profilin-1的表达变化。 结果:1KATP通道开放剂纳他卡林可浓度依赖性的升高S1177、S635位点的磷酸化和T495位点的去磷酸化，而对S116、S615位点无影响。此作用可被KATP通道特异性阻断剂格列苯脲拮抗。2毛果芸香碱没能刺激正常内皮细胞释放NO;而乙酰胆碱、氧化震颤素和槟榔碱均可刺激正常内皮细胞释放NO，此作用在M3受体沉默的细胞上消失。3内皮细胞被施以乙酰胆碱和氧化震颤素后Destrin明显减少;FKBP1A的蛋白表达也在乙酰胆碱、氧化震颤素和烟碱孵育后下调近70％。毛果芸香碱孵育12h后， profilin-1明显增加，MIF下降;施与烟碱的细胞， profilin-1有明显增加，MIF减少。 结论：1纳他卡林通过开放内皮细胞KATP通道，调节eNOS磷酸化影响eNOS的活性。2M受体激动剂可通过激活内皮细胞M3受体影响细胞功能。3 Destrin、FKBP1A、MIF、profilin-1这些小分子蛋白的发现为进一步研究激活非神经性乙酰胆碱受体对内皮功能的影响提供新思路。