鹦鹉热衣原体（Chlamydia psittaci）是一种胞内寄生菌,也是重要的人兽共患病。鸭和鸽子是鹦鹉热衣原体重要的存储库,鹦鹉热衣原体感染机体常常表现为持续感染、反复感染或隐性感染,是畜禽健康养殖卡脖子的技术难题之一。为了探索鹦鹉热衣原体对于种鸭输卵管、产蛋性能的影响,本课题进行了病原分离、鉴定;鹦鹉热衣原体主要外膜蛋白（Major outer membrane protein,MOMP）真核表达和优化;评价不同抗原组合、不同免疫途径对鹦鹉热衣原体的免疫保护。1.种鸭鹦鹉热衣原体分离和鉴定:针对温氏集团浙江分公司产蛋种鸭场出现产蛋率下降、受精率降低,采集病料进行病原分离、检测和病原回归试验。以荧光定量聚合酶链反应（Taqman probe-q PCR）检测衣原体23S r RNA基因和鹦鹉热衣原体inc A基因,检测发现发病种鸭卵巢组织鹦鹉热衣原体呈现阳性。然后,病料分别接种SPF鸡胚和He La细胞,分离病原和分析比对omp A基因,确定该菌株为A型鹦鹉热衣原体（guangdong＿strain＿19）,鸡胚测定其ELD50为190IFU EB。经生殖道接种10~6 IFU EB后产蛋鸭的卵巢、卵泡出血和破裂,严重出现腹膜炎,这提示分离株对种鸭的生殖系统有致病性。2.MOMP蛋白的真核表达载体构建和表达:将分离株omp A基因克隆入杆状病毒转移载体（p Fast Bac-omp A）,后转化入大肠杆菌DH10Bac中,重组克隆菌进行扩增和抽提重组杆粒（Bacmid）,以重组杆粒转染昆虫细胞（Sf9）和制备重组杆状病毒,传代且收集P3代病毒,Western-blot结果显示重组MOMP蛋白与His标签单抗产生特异性免疫印迹反应。利用50%Ni-NTA树脂成功纯化得到真核表达的重组MOMP蛋白。3.不同抗原组合、不同免疫途径对疫苗效力的影响:分别以重组MOMP蛋白、5种重组Pmp G蛋白为免疫抗原,配合壳聚糖凝胶和霍乱弧菌佐剂,比较肌肉注射和滴鼻免疫的免疫应答和攻毒保护特点。结果显示重组MOMP蛋白无论是滴鼻途径,还是肌肉注射途径,都可以诱导高水平的特异性抗抗体,同时刺激淋巴细胞增殖,产生高水平的IFN-γ和IL-12,降低卵巢和卵泡的病变。同时发现多种重组Pmp G注射免疫组与重组MOMP蛋白2种免疫途径效果差异不显著,这提示多种重组Pmp G和真核表达MOMP是鹦鹉热衣原体的重要免疫抗原成分。综上所述,分离的A型鹦鹉热衣原体与种鸭产蛋下降密切相关,利用杆状病毒制备的MOMP蛋白通过注射/滴鼻2种途径均可以诱导良好的体液免疫和细胞免疫,为鸭鹦鹉热衣原体防控提供了新的技术方法。