驼血中降血压降血脂多肽的制备及鉴定

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:jiaozhixuan
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为了多维度开发驼血产品,开发出具有降高血压和降高血脂功能的新型驼血多肽,提升农副加工业的废弃资源的利用率,为驼血多肽产品成为预防和辅助治疗高血压和高血脂的功能性保健产品提供科学依据,同时也为驼血多肽产品的推广应用提供技术支持。本试验使用蛋白酶酶促水解的方法制备多肽,比较了市场上常见的复合蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶连续酶解的作用效果,确定了使用体外模拟胃肠消化来粗提降血压降血脂多肽的方案;通过超滤、Sephadex-25葡聚糖凝胶层析纯化降血压降血脂多肽,并测定和收集具有最佳降血压和降血脂作用的组分;利用氨基酸自动分析仪分析了降血压降血脂多肽的氨基酸组成,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪确定了降血压降血脂多肽的分子量和氨基酸序列。主要试验结果如下:(1)最优酶的选择表明骆驼血液经过超声波破碎、透析等预处理后,在胃蛋白酶和胰蛋白酶共同作用下,底物浓度为5%,酶添加量为5%,最适温度和最适pH,酶解4 h的条件下,样品中大分子的蛋白质可以较好的被水解成小分子多肽,其ACE抑制率和HMG-CoA还原酶抑制率都较高于其他酶解方案。(2)降血压降血脂多肽的纯化表明:3 kDa超滤管截流而得的分子量小于3 kDa多肽液具有较高的ACE抑制率,其ACE抑制率为61.8%;经3 kDa和10 kDa超滤管共同作用而得的分子量为3 kDa~10 kDa的多肽液具有较高的HMG-CoA还原酶抑制率,其H MG-CoA还原酶抑制率为11%。(3)在驼血降血压降血脂多肽的鉴定中,降血压多肽分子量为600 Da~1756 Da,其氨基酸序列为NPRNR、VVDMPCTR、VDEVGWALGR;降血脂多肽分子量为4114.66 Da~4387.3164 Da,其氨基酸序列为RVADEVGGEAIGR、E AVAAHHPGDFTPDAH、PDDDHGPGLNHLNNNK。
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