本实验以铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.为研究对象，从植物组织培养入手，首先建立其离体再生系统，优化离体培养的各种因素，为进行纳米材料添加实验提供充足的、生长旺盛的实验材料。在此基础上，依据纳米材料的特殊性能，采用纳米二氧化钛（TiO2）和纳米二氧化硅（SiO2）两种纳米材料作为添加剂，在铁皮石斛不同培养阶段，分别添加不同浓度的纳米TiO2、纳米SiO2及纳米TiO2-SiO2组合，探讨了无机纳米材料对铁皮石斛离体培养的影响，为培育高效、高产铁皮石斛药材提供技术参考。主要研究成果如下：　　1.铁皮石斛离体再生系统的建立　　选取铁皮石斛的带节茎作为外植体进行离体培养，通过比较基本培养基、植物激素、添加物等影响因子，筛选出铁皮石斛离体再生的最佳培养基。研究表明：铁皮石斛侧芽萌发的最佳培养基为N6+BA1mg/L+NAA0.1mg/L+7%马铃薯汁；丛芽诱导及增殖的最佳培养基为N6+BA1mg/L+NAA0.5mg/L+20%马铃薯汁；以丛生幼芽作为外植体在MS+BA2mg/L+NAA0.5mg/L培养基上诱导拟圆球茎效果较好，MS+NAA1mg/L较适于拟圆球茎增殖，MS+BA2mg/L+NAA0.2mg/L对拟圆球茎分化效果较好；试管苗壮苗生根的最佳培养基为N6+BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L+10%马铃薯汁+20%香蕉汁+0.3％活性炭；选用树皮和碎木块组合（1：1），上覆1cm厚的水苔作为移栽基质，幼苗成活率可达95%以上。　　2.纳米TiO2对铁皮石斛离体培养的影响　　纳米TiO2对铁皮石斛侧芽及丛芽的诱导有较明显促进作用，可显著提高侧芽（丛芽）诱导率及出芽数（增殖倍数）。但纳米TiO2对侧芽（丛芽）和小苗的生长有抑制作用，且随着剂量的增加抑制作用增强，浓度在5g/L及以上时，植株明显矮小、黄化，并诱导产生很多难以分化的淡黄色愈伤组织，小部分苗产生变异现象。　　3.纳米SiO2对铁皮石斛离体培养的影响　　纳米SiO2对铁皮石斛侧芽（丛芽）诱导及小苗的生长均有显著促进作用，苗的生长情况较对照明显好转，但纳米SiO2不同浓度对离体培养的作用不同。纳米SiO2在5g/L时对侧芽及丛芽诱导促进效果较明显，既可显著提高侧芽（丛芽）诱导率及出芽数（增殖倍数），又对侧芽（丛芽）的生长有一定的促进作用。随着添加浓度的增加，纳米SiO2促进发芽的作用逐渐减弱，对小苗或小芽生长的促进作用不断增强。当纳米SiO2在20g/L时对侧芽（丛芽）的诱导无显著促进作用，但可极显著促进侧芽（丛芽） 及试管苗的生长。在实验过程中随着添加剂量的增加，未发现纳米SiO2对试管苗产生毒害作用。　　4.纳米TiO2-SiO2组合对铁皮石斛离体培养的影响　　选用低浓度的纳米TiO2（5g/L）和纳米SiO2（5g/L）组合，即可显著提高侧芽及丛芽的发芽数，又可促进芽的生长，较适宜侧芽及丛芽诱导阶段，两者5～10g/L的4个浓度组合均对试管苗壮苗生根有抑制作用，不适于壮苗生根阶段使用。