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本实验拟在体外培养SD大鼠MSCs,应用3H-TdR标记后移植入DMD的模型鼠mdx鼠进行移植,观察MSCs移植后在体内的分布情况;应用BrdU标记MSCs检测Dystrophin和Utrophin在体内的表达量和表达时间规律,以及其表达对mdx鼠的肌酸激酶(CK)、核中心移位的影响;并检测MyoD和myogenin及骨骼肌的特异性标志物胚胎型肌凝蛋白重链(devMHC)在体内的表达量和表达时间规律,探讨MSCs移植后在体内分化为骨骼肌的可能机制,为最终应用于临床实验提供理论基础。结论:应用3H-TdR标记法可以有效地标记MSCs进行移植后的体内分布研究,并且长达4个月的追踪,早期MSCs主要分布于血流丰富的器官,以后随时间延长MSCs具有明显的归巢现象,并可受病损肌肉的微环境影响向肌肉趋化,随时间延长MSCs在肌肉中分布逐渐增加。采用差速贴壁法将MSCs有效分离后,应用BrdU标记,标记率可达98%以上,可以追踪尾静脉移植后MSCs在体内的分化过程。应用3H-TdR标记或者BrdU标记MSCs并追踪其在mdx鼠体内变化,各组织器官均未发现肿瘤发生,因而MSCs移植是安全可靠的。MSCs移植后mdx鼠有DYS表达,并且随时间延长增加,应用激光共聚焦技术表明DYS阳性肌纤维来自于移植的MSCs。Utrophin在mdx鼠肌膜表达上调,在DMD疾病中对DYS有一定的功能替代作用。MSCs移植后DYS的表达对Utrophin有抑制作用,二者存在互补关系,但Utrophin的mRNA水平却无改变。MSCs移植后追踪MyoD和Myogenin的表达变化,表明部分MyoD和Myogenin阳性细胞核来源于移植的MSCs,提示成肌调节因子可能有促进MSCs分化为骨骼肌细胞的作用。