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目的:(1)建立稳定表达肺癌抑癌基因—1(TSLC1)的人前列腺癌T3B细胞系并对其进行鉴定;(2)探讨TSLC1基因对人前列腺癌T3B细胞增殖和侵袭的生物学特性影响;(3)研究TSLC1对人前列腺癌T3B细胞成瘤和转移能力的影响。方法:(1)脂质体转染的方法将pCI-TSLC1质粒稳定转染至T3B细胞系,经克隆化培养以及G418筛选,建立了稳定表达TSLC1蛋白的细胞系。分别从核酸和蛋白水平对转染进行鉴定,并对其细胞纯度、遗传稳定性等生物学特性进行鉴定。(2)以稳定表达外源基因TSLC1的人前列腺癌T3B细胞为实验组,以转染空质粒pCI-neo的T3B细胞为对照组,野生型T3B细胞为空白组。MTT法检测细胞增殖,FACSort流式细胞仪检测细胞周期,AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况,Tanswell法检测细胞体外侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。(3)将培养的实验组、对照组、空白组三组肿瘤细胞分别以4.0×106/200μL浓度注入裸鼠皮下,观察各组成瘤情况。按上述分组以4.0×106/200μL浓度进行尾静脉注射观察建立转移模型。将三组细胞分别以2.0×106/10μL进行骨原位注射建立骨转移瘤模型,观察各组骨转移率。结果:(1)成功获得高表达TSLC1的稳定细胞系,核酸和蛋白水平鉴定都说明TSLC1基因成功整合到细胞基因组中。生物学性状研究结果表明该转基因细胞系纯度好,遗传性状稳定。(2)与对照组和空白组相比,实验组细胞株细胞生长速度减慢,增殖受到明显抑制;实验组细胞周期发生了明显的G0/G1期阻滞;实验组细胞早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高(P<0.01);体外侵袭和迁移能力受到较大抑制(P<0.05)。(3)实验组皮下瘤出现明显晚于对照组和空白组,而且瘤体也明显小于对照组和空白组(P<0.01);尾静脉注射注射后实验组体内肺转移形成时间晚,转移灶数目少;实验组的骨转移率为20%,明显低于对照组(100%)和空白组(100%),P<0.05。结论:(1)成功建立了稳定表达TSLC1的T3B细胞系,该细胞系遗传性质稳定,为进一步研究TSLC1在前列腺癌中发挥的作用奠定了基础。(2) TSLC1基因能明显抑制T3B细胞的增殖和侵袭,并诱导细胞发生凋亡。(3) TSLC1基因明显抑制T3B细胞的成瘤和转移能力。