为了研究类固醇激素是否通过体细胞参于哺乳动物胚胎的发育调控。本文探讨了P₄（Progesterone,P₄）和雌二醇（Estradiol,E₂）对牦牛输卵管上皮细胞分泌输卵管糖蛋白（oviductin,Ovn）及骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）的影响。选用牦牛输卵管上皮细胞,采用组织块培养法和胰蛋白酶消化法获得牦牛输卵管上皮细胞,运用RT-PCR克隆和核酸测序获得牦牛骨桥蛋白cDNA;选取第4代牦牛输卵管上皮细胞,分别加入不同浓度的P₄和E₂,运用实时荧光定量（quantitative Real-time PCR,qRT-PCR）和免疫荧光（Immunofluorescence technique,IF）分别分析P₄和E₂对体外培养牦牛输卵管上皮细胞Ovn和OPN表达的影响;用酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay,Elisa）测定不同浓度P₄和E₂作用后上清培养液中OPN的浓度。研究结果表明:（1）当P₄浓度为5²5 ng/mL时,随着P₄浓度的增加Ovn的表达量也逐渐增高;当P₄为25 ng/mL时,Ovn基因和蛋白表达量为最高;P₄浓度为50²00ng/mL时,Ovn基因和蛋白的表达量随着浓度的增加反而逐渐减少。（2）E₂可以提高牦牛输卵管上皮细胞的Ovn mRNA和蛋白相对表达量;当E₂浓度为25 ng/mL时,输卵管上皮细胞的Ovn mRNA和蛋白相对表达量最高,显著高于E₂浓度为10、50、100和200 ng/mL组;对照组Ovn mRNA和蛋白表达量最低。（3）牦牛的OPN与黄牛的同源性最高,达到99.2%;牦牛与山羊（Capra hircas）、绵羊（Ovis aries）、野猪（Sus scrofa）的相似性分别为93.8%、93.4%、73.6%;牦牛的OPN基因为1135 bp,包含完整开放阅读框837 bp,共编码278个氨基酸（GenBank登录号:KY402045）。（4）体外培养体系中添加不同浓度的P₄,OPN的mRNA和蛋白表达量均有所增加,且当P₄浓度为25 ng/mL时达到最高;添加不同浓度E₂ OPN的mRNA和蛋白表达量均有所下降,当E₂浓度为100 ng/mL时达到最低。（5）当P₄浓度为0²5 ng/mL时,OPN蛋白相对浓度随着P₄浓度的升高而增升高,且当P₄浓度为25 ng/mL时OPN的浓度达到最高,而后OPN蛋白相对浓度随着浓度的升高而下降;当E₂浓度为0¹00 ng/mL时,OPN蛋白相对浓度随着浓度升高而下降,且当E₂浓度为100 ng/mL其浓度达到最低,而后当E₂浓度为200 ng/mL时其浓度又有所增加。